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Human EGF ELISA KIT
Human EGF ELISA KIT 是一款用于精準(zhǔn)檢測(cè)人體樣本中表皮生長因子（EGF）含量的專業(yè)試劑盒,，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究與臨床診斷中具有重要價(jià)值。EGF 是一種具有廣泛生物學(xué)活性的多肽類生長因子,，由 53 個(gè)氨基酸殘基組成，其分子量約為 6.2 kDa,。它通過與靶細(xì)胞表面的 EGF 受體（EGFR）特異性結(jié)合，激活一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,，對(duì)細(xì)胞的增殖,、分化、遷移以及存活等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用,。
該試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）技術(shù)，其核心原理基于抗原與抗體的特異性結(jié)合。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板預(yù)先包被有針對(duì) EGF 的高親和力特異性抗體,。當(dāng)含有 EGF 的樣本,，如血清,、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿等加入酶標(biāo)板孔后,，樣本中的 EGF 會(huì)迅速與包被抗體特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對(duì) EGF 不同抗原表位的檢測(cè)抗體,，二者結(jié)合形成穩(wěn)定的 “包被抗體 - EGF - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物,。接著添加酶的底物，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng),，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào),，常見為顏色變化或熒光信號(hào)。通過酶標(biāo)儀測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度,，并與試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,，即可精確計(jì)算出樣本中 EGF 的含量,。
試劑盒組成豐富且合理，一般包含預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板,，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的不同濃度 EGF 標(biāo)準(zhǔn)品,，酶標(biāo)抗體工作液,、底物、終止液,，以及用于清洗未結(jié)合物質(zhì)的濃縮洗滌液等,。同時(shí)，配備詳細(xì)的操作說明書,，為實(shí)驗(yàn)人員提供從樣本采集,、處理，到實(shí)驗(yàn)步驟,、結(jié)果判讀等全fang位準(zhǔn)確的操作指導(dǎo)。
在操作流程上,，首先要依據(jù)研究或診斷目的采集合適樣本,。若研究全身性生理病理變化,，血清或血漿樣本較為常用；若聚焦細(xì)胞層面的 EGF 分泌機(jī)制,，細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本更具針對(duì)性；而對(duì)于組織局部微環(huán)境的研究,，則需制備組織勻漿,。采集后的樣本需及時(shí)進(jìn)行離心等處理以獲取清亮的待測(cè)液。將樣本和試劑盒中的試劑平衡至室溫后,，嚴(yán)格按照要求對(duì)樣本及試劑進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋。然后精確加樣到酶標(biāo)板,，在適宜溫度下溫育一段時(shí)間，確保抗原抗體充分反應(yīng),。之后用洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板,，徹di去除未結(jié)合物質(zhì)，減少非特異性信號(hào)干擾,。接著依次加入酶標(biāo)抗體工作液、底物,，按規(guī)定時(shí)間反應(yīng),，最后加入終止液終止反應(yīng),，并立即用酶標(biāo)儀檢測(cè)信號(hào)。