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IL-13R alpha-2 ELISA
IL-13R alpha-2 ELISA 是一種用于定量檢測人體樣本中白細(xì)胞介素 - 13 受體 α2 鏈（IL-13Rα2）含量的酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。IL-13Rα2 在免疫系統(tǒng)及多種生理病理過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,。它主要表達(dá)于多種細(xì)胞表面,，如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等,，與白細(xì)胞介素 - 13（IL-13）特異性結(jié)合,，調(diào)控細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而影響細(xì)胞的增殖,、分化和功能,。
IL-13R alpha-2 試劑盒的核心原理基于抗原與抗體的特異性結(jié)合。實驗前,，先將針對 IL-13Rα2 的特異性抗體包被在固相載體,，通常為酶標(biāo)板表面。當(dāng)含有 IL-13Rα2 的樣本,，如血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿等加入酶標(biāo)板孔后,，樣本中的 IL-13Rα2 會迅速與包被抗體特異性結(jié)合,。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對 IL-13Rα2 不同抗原表位的檢測抗體，形成 “包被抗體 - IL-13Rα2 - 酶標(biāo)抗體" 的夾心結(jié)構(gòu),。接著添加酶的底物,，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號,，常見為顏色變化或熒光信號,。通過酶標(biāo)儀測量信號強(qiáng)度，并與試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,，即可精確計算出樣本中 IL-13Rα2 的含量,。
操作 IL-13R alpha-2 試劑盒 時，需嚴(yán)格遵循規(guī)范流程,。首先要根據(jù)研究或診斷目的采集合適樣本,。若研究全身性免疫反應(yīng)，血清或血漿樣本較為常用,；若聚焦細(xì)胞層面的 IL-13Rα2 表達(dá)機(jī)制,，細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本更具針對性；對于組織局部免疫微環(huán)境的研究,，則需制備組織勻漿,。采集后的樣本需及時進(jìn)行離心等處理以獲取清亮的待測液。將樣本和試劑盒中的試劑平衡至室溫后,，嚴(yán)格按照要求對樣本及試劑進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋,。然后精確加樣到酶標(biāo)板，在適宜溫度下溫育一段時間,，確?？乖贵w充分反應(yīng)。之后用洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板,，徹di去除未結(jié)合物質(zhì),，減少非特異性信號干擾。接著依次加入酶標(biāo)抗體工作液,、底物,，按規(guī)定時間反應(yīng)，最后加入終止液終止反應(yīng),，并立即用酶標(biāo)儀檢測信號,。