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標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則: 2 瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至 1ml ,,蓋好后靜置 10 分鐘以上,,然后反復(fù)顛倒 / 搓動(dòng)以助溶解,其濃度為 300 pg/ml ,,做系列倍比稀釋后,,分別稀釋 300 pg/ml , 150 pg/ml ,, 75 pg/ml ,, 37.5 pg/ml , 18.5 pg/ml ,, 9 pg/ml ,, 4.5 pg/ml ,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度 0 pg/ml ,,臨用前 15 分鐘內(nèi)配制,。 如配制 150 pg/ml 標(biāo)準(zhǔn)品:取 0.5ml (不要少于 0.5ml ) 300 pg/ml 的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含 0.5ml 樣品稀釋液的 Eppendorf 管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。 生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則: 臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔 100 μ l ),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml ,。如 10 μ l 生物素標(biāo)記抗體加 990 μ l 生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制,。 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則: 臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔 100 μ l ),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml ,。如 10 μ l 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加 990 μ l 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制,。
人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
前列腺素E2ELISA試劑盒
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝,、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存,。
標(biāo)本:血清,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法,、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等,。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清,、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量,。
●外源性物質(zhì) ●: 外源性物質(zhì)經(jīng)常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集,、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被污染、標(biāo)本貯存過(guò)久,、標(biāo)本凝集 不全和采血管中添加物等影響,。 (1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中,,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果,。為克服上述干擾作用,,標(biāo)本采集時(shí)必須注重避免溶血。(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果,。(3)標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深,、甚至造成 假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),,有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,,亦可出現(xiàn)假陰性,。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的血清 標(biāo)本宜為新鮮采集,;如不能立即測(cè)定,,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩,。(4)標(biāo)本凝集不全 在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h*凝固,。臨床檢驗(yàn)工作中,,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成 肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果,;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?,。為避免上述干擾作用,,解決的辦法好是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?。?)標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用,。綜上所述,,對(duì)臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,在考慮試劑因素和操作因素之外,,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分 析,,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測(cè)結(jié)果,。公司的服務(wù)挺好,,挺專業(yè)的,周期不延期,。滿意
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編輯:小檀20181019
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