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當(dāng)前位置:上海乾思生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>吲哚胺2,3-雙加氧酶ELISA試劑盒 按實(shí)驗(yàn)要求定制
引起 ELISA 測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn),,試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素,。試劑因素:●1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好,、批間差小,、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,,包括底物和洗滌液,。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異,還有抗體,、檢測(cè)方法,、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會(huì)導(dǎo)致對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果不一致,。如:有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%,,標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性,。 3. 要注意試劑的批號(hào)和出廠日期,,雖然試劑的有效期多為 1 年,選擇剛出廠的試劑盒為宜,。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒,。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍,用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo),,造成各種種屬,、各種指標(biāo)都可以做的假象。標(biāo)本因素和操作因素:● 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本,,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種,。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),,可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體、嗜異性抗體,、嗜靶抗原自身抗體,、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等,。外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集,、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細(xì)菌污染,、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
吲哚胺2,3-雙加氧酶ELISA試劑盒
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T,。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝,、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清,、,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法,、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等,。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清,、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量,。
吲哚胺2,3-雙加氧酶ELISA試劑盒試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下:(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl,;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl,?!。?)酶標(biāo)板置4℃,,包被過夜,。(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,,間歇搖動(dòng),。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次,。(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl,。?。?)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),,孵育60min?!,。?)洗板,同(4),?!。?)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl,?!。?)酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。?。?)洗板,,同(4)?!,。?0)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。?。?1)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng),。?。?2)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光,。(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定,。
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編輯:小檀20181015
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