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Nerve Growth Factor ELISA KIT
Nerve Growth Factor ELISA KIT 是一款專門用于精確測定生物樣本中神經(jīng)生長因子（Nerve Growth Factor,，NGF）含量的專業(yè)工具，在神經(jīng)科學(xué),、醫(yī)學(xué)研究等多個領(lǐng)域占據(jù)重要地位,。神經(jīng)生長因子作為一種對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、維持及修復(fù)起到關(guān)鍵作用的蛋白質(zhì),，廣泛參與神經(jīng)元的存活,、分化、軸突生長以及神經(jīng)遞質(zhì)合成等過程,。精準(zhǔn)檢測 NGF 含量,，為深入探究神經(jīng)相關(guān)生理機制，以及眾多神經(jīng)疾病的發(fā)病原理,、診斷和治療提供了關(guān)鍵依據(jù),。
該試劑盒基于經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)原理。試劑盒中的酶標(biāo)板預(yù)先包被有針對神經(jīng)生長因子的高特異性抗體,。當(dāng)含有 NGF 的樣本,，如血清、血漿,、腦脊液,、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清加入酶標(biāo)板孔中時，樣本里的 NGF 抗原會迅速與包被抗體特異性結(jié)合,，形成抗原 - 抗體復(fù)合物,。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對 NGF 的抗體，該抗體能夠識別已結(jié)合在包被抗體上的 NGF,，進而構(gòu)建起穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物,。加入酶的底物后，在酶的催化作用下,，底物發(fā)生顯色反應(yīng),，顏色的深淺與樣本中 NGF 的含量呈正相關(guān)。通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度,，并與試劑盒所提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對,，就能精確計算出樣本中 NGF 的含量。
在操作流程上,，獲取優(yōu)質(zhì)樣本至關(guān)重要,。以腦脊液樣本采集為例,，必須嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，通過專業(yè)的腰椎穿刺等手段獲取樣本,，采集后及時妥善保存并送檢,，避免樣本被污染或發(fā)生成分變化。從冷藏環(huán)境取出試劑盒后,，要將其置于室溫環(huán)境平衡一段時間,，使試劑盒各組分達到適宜的反應(yīng)溫度。嚴(yán)格按照說明書,，精確吸取適量樣本,、不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品以及空白對照，分別加入酶標(biāo)板相應(yīng)孔中,。加入酶標(biāo)抗體后,，輕輕振蕩使反應(yīng)體系充分混勻，然后將酶標(biāo)板放入 37℃恒溫孵育箱中,，孵育特定時間,，確保抗原抗體反應(yīng)充分進行,。孵育結(jié)束,，用洗滌緩沖液多次洗滌酶標(biāo)板，徹di清除未結(jié)合的多余物質(zhì),，降低非特異性干擾,。緊接著加入底物溶液，在避光條件下進行顯色反應(yīng),，在規(guī)定時間內(nèi)迅速用酶標(biāo)儀讀取各孔吸光度數(shù)值,，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣本中 NGF 的濃度。