高靈敏度:能夠敏銳地檢測到極微量的新蝶呤,,檢測下限可達皮克級別。即使在新蝶呤低表達的樣本中,,也能精準測定其含量,助力科研人員深入探究其在正常生理及病理狀態(tài)下低水平表達時的作用,。
特異性強:試劑盒內(nèi)的抗體經(jīng)過嚴格篩選與優(yōu)化,,對新蝶呤具有ji高特異性,與其他生物分子及干擾物質(zhì)幾乎不存在交叉反應,。有效避免了假陽性結(jié)果的出現(xiàn),,極大地保障了檢測結(jié)果的準確性與可靠性。
重復性佳:憑借嚴格的生產(chǎn)工藝和完善的質(zhì)量控制體系,,該試劑盒批內(nèi)和批間重復性表現(xiàn)優(yōu)異,。多次重復檢測同一批次樣本,結(jié)果的變異系數(shù)(CV)被嚴格控制在極小范圍,實驗人員能夠獲取穩(wěn)定且可重復的數(shù)據(jù),,有力地支持了科學研究的可重復性,。
操作便捷:試劑盒配備了齊全的試劑以及詳盡的操作說明書,實驗步驟清晰明了,。即便新手實驗人員,,也能快速上手操作。整個檢測流程無需復雜的儀器設備和高深的專業(yè)技能,,顯著節(jié)省了實驗時間與人力成本,。
檢測范圍寬:其檢測范圍覆蓋了新蝶呤在正常生理以及多種病理狀態(tài)下常見的濃度區(qū)間。既能精準檢測正常情況下低水平的新蝶呤表達,,也能準確測定在疾病或?qū)嶒灨深A后可能出現(xiàn)的高水平新蝶呤變化,,適用于各類相關研究場景。
樣本準備:根據(jù)實驗目的收集血清,、血漿、尿液等樣本,。確保樣本采集過程規(guī)范,,避免污染、溶血等情況干擾檢測結(jié)果,。若樣本采集后需保存,,應置于 - 20℃或 - 80℃冰箱,防止反復凍融,。
試劑準備:從冰箱取出試劑盒,,使其恢復至室溫。按照說明書依次準備好標準品,、酶標抗體,、底物、洗滌液等試劑,。標準品需進行系列倍比稀釋,,用于繪制標準曲線。
加樣:將稀釋好的標準品和處理后的樣本加入預包被有抗新蝶呤抗體的微孔板中,,同時設置空白對照孔,。輕輕振蕩使液體混合均勻,隨后將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,,促使樣本中的新蝶呤與包被抗體充分結(jié)合,。
洗滌:孵育結(jié)束后,倒掉孔內(nèi)液體,,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,,以清除未結(jié)合的物質(zhì),,降低非特異性背景信號。每次洗滌后要將微孔板拍干,,確保洗滌效果,。
加酶標抗體:向每孔加入適量酶標抗體,再次輕輕振蕩混勻,,放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,,讓酶標抗體與已結(jié)合在包被抗體上的新蝶呤結(jié)合。
再次洗滌:重復洗滌步驟,,去除未結(jié)合的酶標抗體,。
顯色:向每孔加入底物工作液,輕輕振蕩混勻,,將微孔板置于 37℃避光環(huán)境孵育,,此時酶標抗體上的酶會催化底物顯色,顏色會逐漸變深,。
終止反應:當顯色達到預期效果,,加入終止液終止反應。溶液顏色隨即固定,,應立刻使用酶標儀在特定波長下測定各孔吸光度值,。
結(jié)果計算:根據(jù)標準品的吸光度值繪制標準曲線,依據(jù)樣本的吸光度值從標準曲線上查出對應的新蝶呤濃度,,并結(jié)合樣本的稀釋倍數(shù)進行校正,,最終得出樣本中新蝶呤的實際濃度。