高靈敏度:能夠敏銳探測到極微量的 OIT3,,檢測下限可達(dá)皮克級別,。即便樣本中 OIT3 低表達(dá),也能精準(zhǔn)測定其含量,,助力科研人員深入探究其在正常生理及病理狀態(tài)下低水平表達(dá)時(shí)的功能,。
特異性強(qiáng):試劑盒內(nèi)的抗體經(jīng)過嚴(yán)格篩選與優(yōu)化,對 OIT3 具有ji高特異性,,與其他結(jié)構(gòu)相似的生物分子及干擾物質(zhì)幾乎不存在交叉反應(yīng),。有效避免了假陽性結(jié)果的出現(xiàn),極大地保障了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性,。
重復(fù)性佳:憑借嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝和完善的質(zhì)量控制體系,,該試劑盒批內(nèi)和批間重復(fù)性表現(xiàn)優(yōu)異。多次重復(fù)檢測同一批次樣本,,結(jié)果的變異系數(shù)(CV)被嚴(yán)格控制在極小范圍,,實(shí)驗(yàn)人員能夠獲取穩(wěn)定且可重復(fù)的數(shù)據(jù),,有力地支持了科學(xué)研究的可重復(fù)性,。
操作便捷:試劑盒配備了齊全的試劑以及詳盡的操作說明書,實(shí)驗(yàn)步驟清晰明了,。即便新手實(shí)驗(yàn)人員,,也能快速上手操作。整個(gè)檢測流程無需復(fù)雜的儀器設(shè)備和高深的專業(yè)技能,,顯著節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間與人力成本,。
檢測范圍寬:其檢測范圍覆蓋了 OIT3 在正常生理以及多種病理狀態(tài)下常見的濃度區(qū)間。既能精準(zhǔn)檢測正常情況下低水平的 OIT3 表達(dá),也能準(zhǔn)確測定在疾病或?qū)嶒?yàn)干預(yù)后可能出現(xiàn)的高水平 OIT3 變化,,適用于各類相關(guān)研究場景,。
樣本準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖占?、血漿,、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本,。確保樣本采集過程規(guī)范,,避免污染、溶血等情況干擾檢測結(jié)果,。若樣本采集后需保存,,應(yīng)置于 - 20℃或 - 80℃冰箱,防止反復(fù)凍融,。樣本在解凍時(shí)需在 4℃緩慢進(jìn)行,避免溫度過高導(dǎo)致 OIT3 活性改變,。
試劑準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,使其恢復(fù)至室溫,。按照說明書依次準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗體,、底物、洗滌液等試劑,。標(biāo)準(zhǔn)品需進(jìn)行系列倍比稀釋,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。準(zhǔn)備試劑時(shí)要使用干凈的移液器及槍頭,,不同試劑的移液器分開使用,,防止交叉污染,。
加樣:將稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和處理后的樣本加入預(yù)包被有抗 OIT3 抗體的微孔板中,,同時(shí)設(shè)置空白對照孔,。輕輕振蕩使液體混合均勻,,隨后將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時(shí)間,,促使樣本中的 OIT3 與包被抗體充分結(jié)合,。加樣時(shí)要保證移液器的準(zhǔn)確性,,加樣體積精準(zhǔn),避免產(chǎn)生氣泡影響檢測結(jié)果,。
洗滌:孵育結(jié)束后,,倒掉孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,,以清除未結(jié)合的物質(zhì),,降低非特異性背景信號(hào),。每次洗滌后要將微孔板拍干,,確保洗滌效果。洗滌過程中要保證洗滌液充分覆蓋孔壁,且每次洗滌的時(shí)間和力度一致。
加酶標(biāo)抗體:向每孔加入適量酶標(biāo)抗體,,再次輕輕振蕩混勻,,放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時(shí)間,,讓酶標(biāo)抗體與已結(jié)合在包被抗體上的 OIT3 結(jié)合。加酶標(biāo)抗體時(shí)要避免試劑滴落在孔外。
再次洗滌:重復(fù)洗滌步驟,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,。操作要求與第一次洗滌一致,,確保洗滌徹di。
顯色:向每孔加入底物工作液,,輕輕振蕩混勻,,將微孔板置于 37℃避光環(huán)境孵育,,此時(shí)酶標(biāo)抗體上的酶會(huì)催化底物顯色,顏色會(huì)逐漸變深,。顯色過程要嚴(yán)格控制時(shí)間,避免顯色過度或不足,,且孵育環(huán)境需保持避光。
終止反應(yīng):當(dāng)顯色達(dá)到預(yù)期效果,,加入終止液終止反應(yīng),。溶液顏色隨即固定,應(yīng)立刻使用酶標(biāo)儀在特定波長下測定各孔吸光度值,。加入終止液后應(yīng)迅速測量吸光度,,以免溶液長時(shí)間放置導(dǎo)致顏色變化影響結(jié)果準(zhǔn)確性。
結(jié)果計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,依據(jù)樣本的吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對應(yīng)的 OIT3 濃度,,并結(jié)合樣本的稀釋倍數(shù)進(jìn)行校正,最終得出樣本中 OIT3 的實(shí)際濃度,。計(jì)算過程要仔細(xì),,確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確無誤。