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兔子基質金屬蛋白酶MMP-4試劑盒
兔子基質金屬蛋白酶MMP-4試劑盒——依托復旦大學,，集研發(fā)、銷售,、實驗室技術服務的產品涉及分子生物學,、細胞生物學、細菌學,、遺傳學,、免疫學,、生物化學、蛋白質學,、細胞治療,、臨床應用等領域。
類別簡介:"專業(yè)經營進口胎牛血清,、細胞因子,、ELISA試劑盒、細胞,、抗體,、生物試劑、耗材,、培養(yǎng)基,、一抗、二抗,、其產品吸附均勻,，吸附性好，空白值低,，孔底透明度高,， 代做ELISA實驗等。"
供應商 :拜力生物
貨期 :7-10天
1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫,，使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。 實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染,。
2. 加樣：加樣或加試劑時,，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時,，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性,。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣,。
3. 孵育：為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā),；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。
4. 洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù),。
5. 試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品,、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制,，不能混淆,。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,，一次不要小于10μl),，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
6. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘),，如顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù),。
7. 底物：底物請避光保存,，在儲存和溫育時避免強光直接照射。建議檢測樣品時均設雙孔測定,，以保證檢測結果的準確性,。如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定,，計算時請后乘以稀釋倍數(shù),。
◇ 液體類標本:標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。
◇ 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清,。如有沉淀形成,，應再次離心。
◇ 血漿：應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。
◇ 尿液,、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。
◇ 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分： (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑),； (2)酶標記的抗原或抗體(結合物),； (3)酶的底物； (4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),，參考標準品和控制血清(定量測定中),； (5)結合物及標本的稀釋液； (6)洗滌液，在板式ELISA中,，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,； (7)酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸,，其濃度按加量及比色液終體積而異,，在板式ELISA中一般采用3mol/L。
實驗技術服務：熒光定量pcr服務,、hplc(高效液相色譜法檢測)服務,、emsa(凝膠遷移或電泳遷移率實驗)、酶聯(lián)免疫(elisa)實驗技術服務,、免疫組化(ihc)技術服務,、rna干擾(sirna,miran)、雙向電泳,、免疫共沉淀,、科研整體實驗外包服務、流式細胞檢測服務,、細胞培養(yǎng)技術服務,、四甲基偶氮唑鹽比色法(mtt方法、sci生物醫(yī)學論文服務,、熒光原位雜交fish服務,、載體構建實驗技術服務、抑制性消減雜交(ssh)技術服務,、單核苷酸多態(tài)性分析(snp)檢測服務,、real-timepcr實驗技術服務。
