關(guān)鍵詞:CCK-8細胞增殖檢測服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介：世界*品牌CCK-8細胞增殖檢測服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,，質(zhì)量保證,*,。
CCK-8細胞增殖檢測|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費,。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時，我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復(fù)實驗,。另一方面,，我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果,。
產(chǎn)品品牌：CCK-8細胞增殖檢測服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)   http://www.,。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>Cell Counting Kit簡稱CCK8試劑盒,，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒,。
    WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下,，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,，與細胞毒性成反比,。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細胞數(shù)量,。
    CCK8法應(yīng)用非常廣泛,，如藥物篩選、細胞增殖測定,、細胞毒性測定,、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
    酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,；
    細胞毒性非常低,，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到*測定時間,。關(guān)于不同細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇關(guān)于不同細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇,，請參考CCK8法的操作步驟
實驗一：細胞活性檢測
1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）,。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（37℃,5% CO2）,。
2、向每孔加入10 μL CCK8溶液（注意不要在孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）,。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時,。
4,、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。
5,、若暫時不測定OD值,，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定,，吸光度不會發(fā)生變化。
實驗二：細胞增殖-毒性檢測
1,、在96孔板中配置100μL的細胞懸液,。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（37℃,，5% CO2）。
2,、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質(zhì),。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6,、12,、24或48小時）。
4,、向每孔加入10μL CCK8溶液（注意不要再孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）。
5,、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時,。
6、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度,。
7,、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化,。
    注意：如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,，可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,，然后加入新的培養(yǎng)基）,，去掉藥物影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況下,，可以不更換培養(yǎng)基,，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。
    活力計算：
細胞活力*（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100
A（加藥）：具有細胞,、CCK8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0加藥）：具有細胞,、CCK8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力
    保存條件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效,。