高靈敏度:可敏銳檢測到極微量的人絲氨/酸蛋白酶,,檢測下限達皮克級別,。即便在絲氨/酸蛋白酶低表達樣本中,也能精準測定含量,,助力科研人員探究其在生理和病理狀態(tài)下低水平表達時的功能,。
特異性強:試劑盒內(nèi)抗體經(jīng)嚴格篩選與優(yōu)化,對人絲氨/酸蛋白酶特異性ji高,,與其他蛋白酶及干擾物質(zhì)幾乎無交叉反應,,有效杜絕假陽性結果,保障檢測結果準確可靠,。
重復性佳:憑借嚴格生產(chǎn)工藝和完善質(zhì)量控制體系,,試劑盒批內(nèi)和批間重復性表現(xiàn)優(yōu)異。多次重復檢測同一批次樣本,,結果的變異系數(shù)(CV)被嚴格控制在極小范圍,,實驗人員能獲取穩(wěn)定且可重復的數(shù)據(jù),有力支持科學研究的可重復性。
操作便捷:配備齊全試劑及詳盡操作說明書,,實驗步驟清晰明了。新手實驗人員也能快速上手操作,,整個檢測流程無需復雜儀器設備和高深專業(yè)技能,,顯著節(jié)省實驗時間與人力成本。
檢測范圍寬:檢測范圍覆蓋人絲氨/酸蛋白酶在正常生理以及多種病理狀態(tài)下常見的濃度區(qū)間,,既能精準檢測正常情況下低水平的絲氨/酸蛋白酶表達,,也能準確測定在疾病或實驗干預后可能出現(xiàn)的高水平絲氨/酸蛋白酶變化,適用于各類相關研究場景,。
樣本準備:根據(jù)實驗目的收集血清、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)上清等樣本。確保樣本采集過程規(guī)范,,避免污染,、溶血等情況干擾檢測結果。若樣本采集后需保存,,應置于 - 20℃或 - 80℃冰箱,,防止反復凍融。
試劑準備:從冰箱取出試劑盒,,使其恢復至室溫,。按說明書依次準備好標準品、酶標抗體,、底物,、洗滌液等試劑。標準品需進行系列倍比稀釋,,用于繪制標準曲線,。
加樣:將稀釋好的標準品和處理后的樣本加入預包被有抗人絲氨/酸蛋白酶抗體的微孔板中,同時設置空白對照孔,。輕輕振蕩使液體混合均勻,,隨后將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,促使樣本中的絲氨/酸蛋白酶與包被抗體充分結合,。
洗滌:孵育結束后,,倒掉孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,,以清除未結合的物質(zhì),,降低非特異性背景信號。每次洗滌后要將微孔板拍干,確保洗滌效果,。
加酶標抗體:向每孔加入適量酶標抗體,,再次輕輕振蕩混勻,放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時間,,讓酶標抗體與已結合在包被抗體上的絲氨/酸蛋白酶結合,。
再次洗滌:重復洗滌步驟,去除未結合的酶標抗體,。
顯色:向每孔加入底物工作液,,輕輕振蕩混勻,將微孔板置于 37℃避光環(huán)境孵育,,此時酶標抗體上的酶會催化底物顯色,,顏色逐漸變深。
終止反應:當顯色達到預期效果,,加入終止液終止反應,。溶液顏色隨即固定,應立刻使用酶標儀在特定波長下測定各孔吸光度值,。
結果計算:根據(jù)標準品的吸光度值繪制標準曲線,,依據(jù)樣本的吸光度值從標準曲線上查出對應的絲氨/酸蛋白酶濃度,并結合樣本的稀釋倍數(shù)進行校正,,最終得出樣本中絲氨/酸蛋白酶的實際濃度,。