日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上海拜力生物科技有限公司

免疫組化技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時間:2015-8-1閱讀:179

關(guān)鍵詞:免疫組化技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌免疫組化技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*。
免疫組化技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,,承諾客戶不成功不收費(fèi)。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:   http://www.,。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒?yàn)流程:
免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法,、免疫金法及放射免疫自顯影法等,。
免疫組化(LP 法)操作步驟
1. 切片常規(guī)脫蠟至水。如需抗原修復(fù),,可在此步后進(jìn)行
⒉ 緩沖液洗 3min/2 次,。
⒊ 為了降低內(nèi)源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘,。
⒋ 緩沖液洗 5min/2 次。
⒌ 滴加 Ultra V Block ,, 在室溫下孵育 5 分鐘以封閉非特異性的背景染色,。
(注:孵育不要超過 10 分鐘,否則會導(dǎo)致特異性染色降低,。如果一抗的稀釋液中含有 5 - 10% 正常羊血清,,這一步可以省略。)
⒍ 緩沖液洗 5min/2 次,。
⒎ 滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 - 2 小時,。(具體孵育時間和溫度由試驗(yàn)者zui終決定)
⒏ 緩沖液洗 5min/2 次。
9 . 滴加 Primary Antibody Enhancer(增強(qiáng)子),,在室溫下孵育 20 分鐘,。
10 .緩沖液洗 5min/2 次。
11 .滴加 HRP Polymer(酶標(biāo)二抗) ,,在室溫下孵育 30 分鐘,。
(注:HRP Polymer 對光敏感,應(yīng)避免不必要的光暴露并儲存在不透明的小瓶中,。)
12 .緩沖液洗 5min/2 次,。
13 .向 1ml DAB Plus Substrate (或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen (或 AEC Plus Chromogen),混勻后滴加到切片上,,孵育 3 - 15 分鐘,。(具體時間由染色深淺決定。)
14 .自來水充分沖洗,,復(fù)染,,脫水,透明,,封片,。
免疫組化SP法步驟:
1.烤片,68℃,,20分鐘,
2. 常規(guī)二甲苯脫蠟,,梯度酒精脫水;二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I(xiàn) 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min 
3.阻斷 滅活內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2O2 37℃孵育10min,PBS沖洗3X5min,;
4. 抗原修復(fù):置0.01M枸櫞酸緩沖液(PH 6.0)中用煮沸(95℃,,15-20min),自然冷卻20min 以上,,再用冷水沖洗缸子,,加快冷卻至室溫,PBS沖洗3X5min,。
5. 正常羊血清工作液封閉,,37℃10 min,傾去勿洗.
6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育,,PBS沖洗3X5min(用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照),;
滴加生物素標(biāo)記二抗, 37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
7. 滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液,37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
8. DAB/ H2O2反應(yīng)染色,,自來水充分沖洗后,,
蘇木素復(fù)染,常規(guī)脫水,,透明,,干燥,封片,。
免疫組化步驟(ABC法)
1,。4%多聚甲醛常規(guī)灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中,。蠟塊制作,。切片,貼片,。0.01MKPBS清洗5min×3后,; 
2。加入配好的0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%過氧化氫)30min,,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的影響,,0.01MPBS清洗5min×3; 
3,。加入配好的0.3% Triton X100(30% Triton X100+0.01MKPBS 100ml)30min,,以增加細(xì)胞的通透性,0.01MKPBS清洗5min×3,; 
4,。加入用血清稀釋液(牛血清白蛋白1.00g+0.01MPBS 100ml+疊氮納0.08g)稀釋的一抗,4℃存放24-48h,;吸去抗體,,0.01MKPBS洗5min×3; 
5。加入0.01MKPBS稀釋的的二抗,,室溫孵育2h,。0.01MKPBS洗5min×3; 
6,。加入ABC復(fù)合物之類的抗體,,室溫孵育2h,0.01MKPBS洗5min×3,;蒸餾水迅速沖三次,; 
7。加入顯色液,,進(jìn)行免疫組織化學(xué)顯色,,時間一般不超過30min,可不時在顯微鏡下進(jìn)行觀察,,待細(xì)胞著色而背底顏色較淡時馬上吸去顯色液,用蒸餾水迅速沖三次后加入0.01MKPBS終止反應(yīng),; 
8,。梯度酒精脫水之后,封片,,拍照,。 

會員登錄

X

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏,!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功,!我們將在第一時間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,,信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任,。

溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

撥打電話
在線留言