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關鍵詞:單抗定制服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌單抗定制服務|實驗技術服務原裝,,質量保證,*,。
單抗定制服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費,。在獲得重組蛋白產品的同時,,我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面,,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
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測序實驗流程:
單克隆抗體(單抗)應用淋巴細胞雜交瘤技術將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞,通過HAT篩選,,ELISA抗體檢測,,有限稀釋克隆化,選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞,,并產生抗體,,就是單克隆抗體。單抗的zui大優(yōu)勢是它的特異性,、均一性,、性和無限供應性。在免疫學,、醫(yī)學,、生物學等領域的基礎研究和臨床醫(yī)學上,,包括對疾病(包括癌癥)的診斷,、預防和治療等方面,均顯示出巨大的生命力,。
實驗步驟:
1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價較高的小鼠,,取脾細胞與SP2/0細胞融合
3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選,確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩(wěn)定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存,,并免費提供一年的保種服務
細胞檢測:細胞不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌
細胞凍存:液氮凍存(基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
細胞運輸:干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks
細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療詳細介紹
細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術,,要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,,要求工作環(huán)境清潔,、空氣清新,干燥和無煙塵,。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側,,常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室,。
所有細胞入庫之前均經過嚴格的細胞質量檢測和鑒定
所有細胞在出庫之前均經過一次嚴格的質檢認證
確保細胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)
高質量ATCC產品對您的研究非常重要
1.細胞形態(tài)觀察,。細胞膜是每天必須觀察的,看是否清晰,細胞的死亡往往是從細胞膜的破裂開始的,,早期的表現(xiàn)就是細胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影,。
2.細胞往往會有“抱團"現(xiàn)象,抱團生長或死亡,,個人認為應該勤換液或傳代,,盡量避 免細胞抱團。
3.細胞生長迅速,,強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng),,用小瓶養(yǎng)的話,換液不及時,,很容易死亡,。細胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代,并且一般為一傳三,,或一傳四,。
4.培養(yǎng)液:1640培養(yǎng)液,1L一般加碳酸氫鈉2g,,并加雙抗,,胎牛血清濃度*為12%,zui低 不低于10%,,HL60細胞對胎牛血清高度依賴,。培養(yǎng)液PH應調為7.20-7.40之間。
5.防污染,。HL60細胞生長迅速,,較少發(fā)生污染,但常規(guī)措施應該做好,。比如無菌操作,,酒精 消毒等,培養(yǎng)瓶口建議過火,,包括瓶蓋,,應過火4秒左右。
6.凍存,。-20一小時,,-80液氮長期保存。強烈建議液氮長期保存,,盡量不要在-80長期 保存,,死亡率很高。
7.復蘇,。調節(jié)水浴箱溫度為42℃,,并提前在試管內放置10倍培養(yǎng)液,,使培養(yǎng)液溫度與室溫一 致。1分鐘內融化細胞(禁止搖晃凍存管),,移取至試管內,,動作要輕,從試管管底開始慢慢上提移液管,,使細胞在培養(yǎng)液內分布均勻,,離心,洗2次,。
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