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關鍵詞:SNP檢測服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌SNP檢測服務|實驗技術服務原裝,質量保證,*,。
SNP檢測服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,,承諾客戶不成功不收費,。在獲得重組蛋白產品的同時,我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗,。另一方面,,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
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測序實驗流程:
該系統(tǒng)采用ABI 3730xl DNA測序儀,,分型準確率≧99.9%,分型成功率≧95%,。和PCR重測序一樣,,SNaPshot分型也是SNP檢測的金標準。適合5-12個及以上的SNP位點的檢測,。該檢測方法的主要原理為單堿基延伸技術,。即在緊鄰SNP位點的地方設計引物,反應時加入SNP位點引物,,擴增出的帶有SNP位點的PCR產物,,帶熒光標記的ddNTP,,通過單堿基延伸后引物帶上SNP位點堿基相關的熒光,隨后將反應產物在ABI 3730xl核酸檢測儀上分析后,,就能得到SNP位點的信息,。該方法一個反應就能檢測5-12個SNP位點,在充分利用測序法準確直觀的優(yōu)點的同時,,增加了一次反應檢測的位點數(shù),極大地降低了實驗成本,。
*檢測結果準確率在99.9%以上,,和測序法一樣是SNP檢測的金標準。
*一次檢測5-12個位點,,96個樣品,,適合中到大型SNP分型項目。
*應用靈活,??梢愿鶕?jù)需要靈活定制實驗方案,,檢測基因組中任意位置的SNP位點,,甚至可以將不同物種的*基因組放在一起進行檢測。
*檢測費用相對較低,。
CR-測序法:
zui經(jīng)典的方法,,通過PCR擴增包含SNP位點的片段,,測序獲得SNP位點信息,適于調查未知SNP位點和連續(xù)分布(1kb以內)的SNP位點信息,。
PCR-限制性酶切,;
如果某個SNP位點恰好是限制性酶切位點,則通過PCR酶切再結合電泳分析不失為一種簡單經(jīng)濟的區(qū)分方法,,適于單個的SNP位點分析,。
連接酶檢測反應(LDR)分型方法:
連接酶只能連接與模板*互補的兩個片段,利用連接酶這一特性,,通過對需檢測SNP位點上下游設計特異性標記探針,在連接酶的作用下,當特異性的寡核苷酸探針與互補靶序列DNA*配對時連接反應得以順利進行,若寡核苷酸探針與其不*配對,則連接反應不能進行,。zui后通過測序儀檢測標記的寡核苷酸探針,得到分型結果,,是一種簡單的分型方法,,適于樣本量和位點數(shù)目都不大的SNP分析。
HRM:
用熒光定量PCR中的染料法做出的高分辨率溶解曲線,,區(qū)分只有單一堿基不同的PCR擴增片段,,只能在溫控均一度在±0.1℃的儀器中使用。成本低,,適合少數(shù)位點多樣品的SNP掃描,。
Taqman 探針法
應用ABI7900、ABI 7500型實時熒光定量PCR儀,采用ABI合成探針或國產探針,,完成SNP的檢測分析,,適用于位點少,樣本通量高的檢測,。
焦磷酸測序( Pyrosequencing )
應用Qiagen公司PyroMark Q96 ID平臺,,可定量等位基因,即使是低頻率等位基因,;同時可檢測未知突變,;不同的應用實驗可同時在一次運行中實現(xiàn);
質譜法
Sequnom質譜法將穩(wěn)健的單堿基引物延伸反應與靈敏可靠的MALDI-TOF質譜檢測的優(yōu)點相結合,,提供了高靈敏性低成本的SNP檢測服務,。該檢測服務采用專業(yè)的引物設計和基因分型軟件,可對95%以上已被證實的SNP進行實驗設計,。一張芯片可平行完成384個樣本的實驗,,單個wellzui高可達40重反應。
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