關鍵詞:RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*,。
RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,，我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗,。另一方面，我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產(chǎn)品品牌：RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務   http://www.,。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
臨床上甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA）,，8 一微球蛋白（pz—MG ），鐵蛋白（Fer）,，人絨毛膜促性腺激素p亞單位（HCG-13）等的檢測都是競爭性RIA法原理,。競爭性RIA法，根據(jù)加樣順序與溫育次數(shù)的區(qū)別,，反應方式分三種：平衡法,，將非標記抗原（被測物與標準品）、抗體,、標記抗原依次加入反應管,，混勻后一次性溫育至反應達到動態(tài)平衡，再加分離劑分離B（復合物）與F（游離物）如：AFP,，8 一MG,，F(xiàn)er；順序加樣法,，先將非標記抗原（被測物與標準品）,，與抗體在反應管內作*次溫育，待反應達到動態(tài)平衡后,。加入標記抗原,，再作第二次溫育后，分離B與F如：CEA,；急診檢測法：為臨床急需檢測結果而提出的反應方式,，不等RIA 反應達到動態(tài)平衡就終止反應；分離劑的選擇有，PEG（聚乙二醇）,，第二抗體等,。
現(xiàn)在一般采用的是：第二抗體與PEG合用的方法，稱為雙抗體一PEG法,。
PEG原理：PEG濃度達到7 一9 時能使抗原一抗體復合物沉淀。
優(yōu)點：經(jīng)濟,，簡便,，通用。
缺點：重復性差,，非特異性結合率高,。
第二抗體：*抗體是可與被測抗原進行特異結合的抗體，來自家兔或豚鼠,。用*抗體為抗原,，作用到羊，馬身上,，產(chǎn)生的抗*抗體的抗體稱第二抗體,。第二抗體與*抗體在適當條件下發(fā)生特異性結合，生成分子量很大的免疫復合物（AgAb ×Ab ）,，能自然沉淀,。
優(yōu)點：分離效果好。非特異性結合率低,。
缺點：增加經(jīng)費投入,。需要第二次溫育，延長了時間,。
所以就產(chǎn)生了兩者合用的雙抗體一PEG法,，它結合了上述兩種方法的優(yōu)點。
二,、非競爭性RIA,，又稱免疫放射分析（IRMA）
主要特點：標記的是抗體。
按反應原理分為兩種：
（一）單位點IRMA
其原理：抗原只有一個抗原決定簇,，所測的抗原為小分子抗原,，Ab+AgAg Ab+ Ab+ ImAd—Ag ImAd—AgAb+Ag Ab（去除）（負相關）：（ImAd—Ag）固相抗原免疫吸附劑，一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗原,；雙位點IRMA：抗原有兩個抗原決定簇,，所使用的兩種亞型抗體在與同一抗原分子結合時互不干擾ImAd—Ab+AgImAd—Ab—Ag+ AbImAd-Ab—Ag- Ab+ Ab（過剩的，游離的）：（ImAd—Ab）固相抗體免疫吸附劑,，一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗體,。
（二）雙位點IRMA,，又稱雙抗體夾心法
從加樣測定順序上看，有三種方法：固相抗體先與未知抗原結合,，再與標記抗體結合（正向兩步法）,。然后去除游離的標記抗體，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數(shù),；未知抗原先與標記抗體結合,，再與同相抗體結合（反向兩步法）。然后去除游離的標記抗體,，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數(shù),；未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應（一步法，又稱同時加樣法）,。然后去除游離的標記抗體,，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數(shù)。
這三種方法都生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物,，故又稱雙抗體夾心法,。
糖類抗原CA50，CA125就用的是其中的第三種方法（一步法）,，血清中的未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應,，生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物，然后去除游離的標記抗體,，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數(shù),。
三、RIA法的影響因素
pH和離子強度,；反應溫度，溫度一般為37℃,，也有45℃,，室溫，4℃ 冰箱,；反應時間,，操作中的注意事項：戴手套、防護鏡等,，將試劑盒從冰箱中取出,，室溫下放置30 min方可使用。
（1）編號：*排是標準管：根據(jù)標準品濃度由低到高A,，B,，C，D,，E,，F(xiàn),，G……；第二排是被測樣品1,，2,，3，4,，5,，6，……,。
（2）加樣要準確,，移液器的使用（兩個檔位，一檔吸人,，二檔排出）吸頭（一個標本一個吸頭,，避免互相污染）。加試劑：先看瓶簽,，再搖勻,，zui后吸人。（標記物一般為紅色,，一抗為蘭色）,。
（3）溫育時間要保證：按說明書中所要求的時間溫育，可以延長,，不能縮短,。
（4）分離劑加入：混勻靜置時間，可以延長,，不能縮短,。保證抗原抗體復合物與第二抗體的充分結合。
（5）溫度：注意觀察水浴箱的水溫,，誤差不能太大,，為±1℃ ，室溫21℃左右,。
（6）離心時間：也應按說明書中所要求來操作,，轉速一般為3 500r/min。往離心機里放反應管時,，盡量讓它直立（因為傾斜可能會使液體流出）,。吸上清液時，沉淀物在試管底部,，真空泵的吸頭頭部不能直接插人到試管底部中央（會吸走沉淀物,，而我們的目的是分離保留沉淀物），應該使吸頭貼著試管管壁往下放,，并且試管要稍微傾斜,，但要在即將插到沉淀物邊緣時停止,，快速上升取出。少留一點點上清液也可,。主要是保證沉淀物完整,。
（7）進人免疫計數(shù)器測量時，注意觀察做出的曲線好壞：是不是需要修改,，剔除壞點,。
（8）報結果：碰到異常結果，要再次看一看沉淀物是否都在,，患者情況如何,，結果是否與患者情況相符，方可報出,。非競爭性RIA法中,，清洗固相包被珠時，清洗次數(shù)要嚴格按說明書中所要求來操作,，不得減少,。
雖然RIA法的影響因素很多，但操作中只要注意上述事項,，RIA法的穩(wěn)定性還是相當不錯的,。主要是它存在放射污染，這個問題不易解決,，影響了它以后的發(fā)展,，如今電化學發(fā)光免疫分析，化學發(fā)光免疫分析,，酶聯(lián)免疫分析,，磁酶免疫分析等相繼推出，發(fā)展很快,，RIA法將被淘汰,。