以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),, OD 值為縱坐標(普通坐標),,在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD 值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數,;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度,。 注意事項 1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡,。 2. 洗滌過程非常重要,,不充分的洗滌易造成假陽性。 3. 一次加樣時間控制在 5 分鐘內,,如標本數量多,,推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔,。 5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,,計算時請后乘以稀釋倍數,。 6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,,請以相應的稀釋液配制,,不能混淆。 7. 底物請避光保存,。 8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑,。
人類成纖維細胞(多種種屬)實驗科研認可品牌
基質金屬蛋白酶-2ELISA試劑盒
檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
經營種類:進口分裝和原裝,、國產
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存,。
標本:血清、,、細胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等,。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法,、競爭法以及BAS-ELISA等,。
預期應用:ELISA法定量測定血清、,、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量,。
● 試劑盒操作步驟如下: ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度,。由于抗原濃度通常未知,,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜,,用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度,。所需轉印膜的數量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,,一抗要檢測一到兩個稀釋度,,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上,。每個點的體積越少越好(1-5μl),,以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,,在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次,。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分,。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點,,室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,,并加到膜上,,室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次,,每次5分鐘,,用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,,并加到膜上,,室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次,,每次5分鐘,,用盡可能大體積的洗脫液。 9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點*濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干,。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘,。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。 12.蛋白一側朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒,。為獲得*結果,曝光時間可能不同,。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產品,。
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編輯:小檀20181012
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