首先，要選擇合適的吸附劑,，才能較好對(duì)樣品進(jìn)行的凈化,。關(guān)于吸附劑的選擇，一般情況下參考文獻(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn),，如果沒有相應(yīng)文獻(xiàn)可參考,，有2個(gè)方法可供選擇，一個(gè)是根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì)選擇（見圖一）,，一個(gè)是根據(jù)樣品基質(zhì)性質(zhì)來(lái)選擇（見圖二）,。

圖一：根據(jù)目標(biāo)化合物性質(zhì)選擇

圖二：根據(jù)樣品基質(zhì)性質(zhì)選擇

選擇好吸附劑后，選擇合適的柱規(guī)格也非常重要,。

萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質(zhì)量是有限的，一旦超過了這個(gè)數(shù)值,，目標(biāo)物就不能被有效保留,，使得回收結(jié)果大打折扣。

以下給出了萃取柱的上樣容量及洗脫參數(shù),，可以參考一下,。

2,、篩板堵塞

在SPE操作過程中,，我們還經(jīng)常遇到篩板堵塞,，溶液無(wú)法通過固相萃取柱,。

當(dāng)上樣液中含有較多顆粒雜質(zhì)時(shí),，這些顆粒雜質(zhì)會(huì)在篩板上不斷聚集,，形成一層顆粒層,，隨著壓力的增加以及時(shí)間的延長(zhǎng),，顆粒層會(huì)越來(lái)越嚴(yán)實(shí)，最終導(dǎo)致篩板堵死,，溶液無(wú)法通過固相萃取柱,。

以下是常見的固相萃取柱的結(jié)構(gòu)圖，由柱管,、篩板和填料3部分組成,，其中篩板是一種具有多孔結(jié)構(gòu)的材料，起到固定填料和過濾溶液的作用,。

遇到這種情況,，可以在上樣前先高速離心或者過濾，然后取上清液或者濾液過固相萃取柱,，減少顆粒雜質(zhì)的影響,。

案例：食品中人工合成著色劑的測(cè)定，當(dāng)樣品為飲料,、配制酒等液體時(shí),，過固相萃取柱還是很輕松的,，而當(dāng)樣品為糕點(diǎn),、谷物制品以及果凍時(shí),，上樣前需先高速離心或者過濾，否則就很容易出現(xiàn)篩板堵塞的現(xiàn)象,。

3、流速過快或過慢

其次，固相萃取過程中流速不能太快,，流速太快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留以及溶劑與目標(biāo)化合物或者填料的相互作用，從而影響凈化及回收結(jié)果,。當(dāng)然流速也不能太慢,，否則會(huì)大大延長(zhǎng)前處理的時(shí)間。

以下是總結(jié)的原因和對(duì)策：

流速過慢的原因	對(duì)策
SPE選擇的粒徑過小	選擇大粒徑SPE
樣品預(yù)處理后仍有懸浮不溶物	上樣前冷凍離心
樣品粘度太高	樣品稀釋
SPE阻力過大,，液體無(wú)法靠重力滴落	使用手動(dòng)固相萃取柱裝置,，通過調(diào)節(jié)止回閥，氣門,，抽負(fù)壓來(lái)調(diào)節(jié)流速

流速過快的原因	對(duì)策
SPE選擇的粒徑過大	選擇小粒徑的SPE
重力作用時(shí)流速依然很快	使用手動(dòng)SPE裝置,，調(diào)節(jié)止回閥
抽負(fù)壓時(shí)流速過快	調(diào)節(jié)止回閥和氣門，控制真空表壓力恒定在一定范圍內(nèi)

案例：SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱時(shí),，先用水,、甲醇，接著用正己烷淋洗,，正己烷與前兩者的極性不同,，從而導(dǎo)致流速很慢，遇到這種情況,，可以增加負(fù)壓或者選用合適的溶劑進(jìn)行過渡,。

4、凈化效果不理想

還有,，SPE操作過程中,，我們經(jīng)常還會(huì)遇到凈化效果不理想的情況，可采取以下策略：

①改變預(yù)處理方法

②改變淋洗液和洗脫液的強(qiáng)度

例如：淋洗液洗脫強(qiáng)度太弱,，淋洗時(shí)不能將雜質(zhì)淋洗掉,，或者洗脫液的強(qiáng)度太強(qiáng)，洗脫時(shí)將雜質(zhì)一并洗脫下來(lái),，這兩種情況均會(huì)導(dǎo)致凈化效果不理想,。

③選擇合適的作用小柱

例如：當(dāng)遇到一些復(fù)雜樣品，一種填料不能滿足凈化效果時(shí),，可以選擇串聯(lián)固相萃取柱或者采用復(fù)合填料的方式進(jìn)行操作（可以提供定制復(fù)合小柱服務(wù)）,。

④正確進(jìn)行SPE操作

例如，通常上樣前需要活化固相萃取柱,，上樣過程中不能讓填料干涸,，濃縮過程不能有損失,，復(fù)溶的時(shí)候需要充分溶解等等，這些都與操作技能息息相關(guān),。

5,、重現(xiàn)性差

固相萃取中重現(xiàn)性差通常與產(chǎn)品質(zhì)量、流速以及操作有關(guān),。

固相萃取柱中填料的質(zhì)量,、均勻性和松緊度都可能影響到方法的重現(xiàn)性，因此選擇質(zhì)量可靠的廠家很重要,，遇到重現(xiàn)性差的實(shí)驗(yàn),，可以選擇用標(biāo)準(zhǔn)溶液考察一下固相萃取柱的重現(xiàn)性。
固相萃取過程中流速的快慢也是影響重現(xiàn)性的重要因素之一,，上樣,、淋洗、洗脫過程中適當(dāng)降低流速,，通常而言,，流速低于5 mL/min時(shí)結(jié)果較為穩(wěn)定，有些實(shí)驗(yàn)可能需要更慢的流速,。當(dāng)然,，操作者水平的高低也會(huì)影響到結(jié)果的重現(xiàn)性。

具體總結(jié)如下：

可能原因	對(duì)策
操作步驟繁瑣,，人為誤差導(dǎo)致	改變前處理方法或者制定SOP方法
復(fù)雜樣品基質(zhì)除雜效果不佳	改變整個(gè)前處理方法,，加入內(nèi)標(biāo)或與基質(zhì)加標(biāo)數(shù)據(jù)做對(duì)比
上樣過程發(fā)生干涸	重新活化平衡
發(fā)生堵柱現(xiàn)象或者流速過快	前者改變預(yù)處理方法,，后者使用止回閥控制流速

6,、回收率不理想

在實(shí)驗(yàn)中，操作者關(guān)注較多的可能也是關(guān)于加標(biāo)回收率的問題,，固相萃取柱質(zhì)量的優(yōu)劣,、固相萃取方法是否合適、操作者操作技能的高低都可以通過加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,。

原則上加標(biāo)回收率應(yīng)在80%~120%之間,，當(dāng)然對(duì)于多組分目標(biāo)物同時(shí)檢測(cè)時(shí)，這一指標(biāo)可適當(dāng)放寬,。

（1）目標(biāo)物在填料上保留不足

判斷方法：空白溶劑加標(biāo),，回收上樣液和淋洗液，若實(shí)際檢測(cè)濃度超過含量的5%,，說明保留不足,。

可能原因	對(duì)策
SPE柱選擇不合適	選擇更強(qiáng)保留的SPE柱
樣品上樣液或淋洗液的洗脫強(qiáng)度過強(qiáng)	降低樣品上樣液或者淋洗液的洗脫強(qiáng)度
上樣體積/濃度過高，導(dǎo)致過載發(fā)生	減少上樣濃度或者增加填料量
操作過程中,，小柱發(fā)生“干涸"現(xiàn)象	重新進(jìn)行活化/平衡,，保證小柱在淋洗結(jié)束前不能發(fā)生“干涸"現(xiàn)象

（2）目標(biāo)洗脫

判斷方法：空白溶劑加標(biāo),，回收上樣液和淋洗液，沒有檢出目標(biāo)物;但回收洗脫液,，回收率也不高,。

可能原因	對(duì)策
小柱保留太強(qiáng)	選擇保留稍弱的SPE柱
洗脫能力太強(qiáng)	增強(qiáng)洗脫強(qiáng)度
洗脫體積太小	增強(qiáng)洗脫體積

3）其他原因

判斷方法：空白溶劑加標(biāo)，回收上樣液,，淋洗液沒有檢出目標(biāo)物;回收洗脫液,，回收率正常。

可能原因	對(duì)策
預(yù)處理的提取不足	改變提取溶劑
目標(biāo)物質(zhì)不穩(wěn)定,，揮發(fā)或者分解	改變提取和轉(zhuǎn)移方式,，減少加熱溫度，受PH影響較大的化合物可加入緩沖鹽調(diào)節(jié)PH等
預(yù)處理過程復(fù)雜	簡(jiǎn)化預(yù)處理過程
目標(biāo)物與雜質(zhì)結(jié)合	換適當(dāng)?shù)姆椒ǔs質(zhì)
雜質(zhì)干擾效應(yīng)太強(qiáng)	改變前處理方法或與基質(zhì)加標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行對(duì)比
雜質(zhì)過多,，超出小柱最高保留	改變預(yù)處理方法,，減少上樣量或增加小柱填料量

農(nóng)殘,、獸殘前處理中,，你所不太注意的關(guān)鍵點(diǎn)和細(xì)節(jié)……

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