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乳酸作為發(fā)酵反應(yīng)過程中的重要代謝產(chǎn)物,,在發(fā)酵過程監(jiān)控中對其進(jìn)行檢測具有十分重要的意義,。在傳統(tǒng)的發(fā)酵反應(yīng)監(jiān)測中,,一般采用生化分析儀器或離線液相系統(tǒng)進(jìn)行監(jiān)測,。生化分析儀器由于專屬性不夠,,可能影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。而離線液相系統(tǒng)需要人工進(jìn)行樣品提取及前處理,,無法實(shí)現(xiàn)全時段反應(yīng)實(shí)時監(jiān)控,。
本研究將 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng)與發(fā)酵罐聯(lián)用,通過外部電機(jī)驅(qū)動,,在設(shè)定時間從發(fā)酵罐中吸取樣品,,過濾后與外置取樣閥連接,對發(fā)酵反應(yīng)中的乳酸進(jìn)行檢測,,使用預(yù)先設(shè)定的檢測方法進(jìn)行取樣和數(shù)據(jù)分析。在整個發(fā)酵反應(yīng)過程中,,可實(shí)現(xiàn)對發(fā)酵罐中乳酸含量的全自動監(jiān)測,。
實(shí)驗(yàn)方案
色譜條件
結(jié)果與討論
專屬性實(shí)驗(yàn)圖譜
不同監(jiān)測方法下乳酸含量的結(jié)果對比
本研究使用 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng),對某實(shí)際發(fā)酵過程中的乳酸含量進(jìn)行監(jiān)測,。同時作為比較,,使用手動取樣和處理,分別通過生化檢測儀器和離線高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行檢測,。通過這三種檢測方法得到的乳酸含量隨時間變化的趨勢如下圖所示,。
小 結(jié)
本實(shí)驗(yàn)將 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng)與發(fā)酵罐聯(lián)用,,對發(fā)酵過程中的乳酸含量進(jìn)行在線監(jiān)控。通過優(yōu)化色譜條件,,提升乳酸檢測的專屬性,,以保證結(jié)果準(zhǔn)確度。同時,,在線液相色譜系統(tǒng)省去了樣品提取及前處理的過程,,有效減少人為失誤。而全自動化的采集及檢測過程,,相較傳統(tǒng)生化檢測及離線液相色譜系統(tǒng),,大幅度提升監(jiān)測結(jié)果反饋速度。真正意義上實(shí)現(xiàn),,全時段無人化樣品檢測,,對于發(fā)酵罐中乳酸含量的監(jiān)測具有重要價值。
在線液相色譜系統(tǒng)也有望應(yīng)用于監(jiān)測發(fā)酵過程中的其他成分,,例如通過調(diào)整色譜條件,,可以對發(fā)酵罐中的抗體物質(zhì)進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測;通過與質(zhì)譜聯(lián)用,,可以對反應(yīng)過程中的未知雜質(zhì)進(jìn)行定性/定量分析,。
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