分光光度計波長誤差的調(diào)整方法
分光光度計使用一段時間后,,一般都會存在一定的波長誤差,。誤差較小時只需調(diào)整波長刻度盤或波長計數(shù)器,,就能使誤差減小到合格范圍內(nèi),;當波長誤差較大時,,則不能再簡單地運用上述方法進行調(diào)整,。對于不同類型的分光光度計,,由于單色器色散特性的不同,誤差校準方法也有較大的區(qū)別,。
在棱鏡型儀器波長的長波區(qū)和短波區(qū),,棱鏡變化同樣位置時,儀器長波區(qū)的波長變化值將大于短波區(qū)的波長變化值,,即在調(diào)整儀器的波長校準螺絲時,,引起儀器波長變化的情況是非線性的。例如當調(diào)波長校準螺絲使儀器650nm處變化(7~8)nm時,,此時儀器400nm處只會變化1nm左右,。利用這一特性,當儀器出現(xiàn)較大的非線性誤差時,,就能將儀器波長誤差準確而迅速地調(diào)整到合格范圍內(nèi),。
光柵的色散特性是線性的,光柵型儀器的波長誤差一般也是線性的,,波長誤差的調(diào)整方法較為簡單,,這里不作介紹。下面詳細介紹棱鏡型儀器波長誤差的調(diào)整方法,。
方法1:短波區(qū)是負誤差,,長波區(qū)是正誤差時的調(diào)整
例如:某721型儀器短波區(qū)用標準值為430.0nm的標準干涉濾光片檢定,Δλ1=-6nm,。長波區(qū)用標準值為683.0nm的標準干涉濾光片檢定,,Δλ2=10nm,。打開儀器的上部蓋板,松開波長盤上的3個固定螺絲,,將刻度盤向高波長方向移|Δλ1|-1=|-6|-1=5nm(注意:此時波長盤不能動,,只是移動波長刻度盤位置)。即原波長指示為440.0nm,,移動波長刻度盤后指示為445.0nm,。然后緊固刻度盤上的3個螺絲,將儀器調(diào)到長波區(qū)標準濾光片的標準值683.0nm處,。將683.0nm干涉濾光片放入光路,,反時針調(diào)儀器左邊的波長校準螺絲,使儀器透射比為zui大,。再將430.0nm干涉濾光片放入光路,,檢查儀器短波區(qū)波長誤差情況,若還是負誤差,,再用上述方法繼續(xù)調(diào)整,;若是正誤差,按下述方法2繼續(xù)調(diào)整,。
方法2:短波區(qū)是正誤差,,長波區(qū)是負誤差時的調(diào)整
例如:某721型儀器用上述干涉濾光片檢定后,Δλ1=7.0nm,,Δλ2=-8.0nm。此時將儀器波長刻度盤向低波長方向移Δλ1-1=7-1=6nm,,并緊固刻度盤,。再將儀器波長調(diào)到683.0nm處,將683.0干涉濾光片放入光路,,順時調(diào)儀器波長校準螺絲,,使儀器透射比為zui大,其他同方法1,。
用方法1或方法2將儀器高低端波長誤差減小到±1nm后,,(500~600)nm之間的波長誤差將不會很大。該方法適用于各種棱鏡型紫外分光光度計和可見分光光度計,。讀者可根據(jù)平時的調(diào)修經(jīng)驗參考使用,。