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海能儀器:豬和牛脂肪中孕酮殘留量的測定(液相色譜法)

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醋酸美侖孕酮,、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮為合成的孕激素類藥物,,有明顯的孕激素和抗雄激素作用,可抑制排卵,。孕激素對垂體促性腺激素的釋放有一定的抑制作用,,動物實驗表明有死胎率增加和致畸作用,副作用有:(1)惡心,、頭暈,、倦怠,;(2)突破性出血,;(3)孕期服用,會增加女性后代的男性化作用,。孕激素類藥物能增強體內物質沉積和改善生產性能,,可以很快產生顯著和直接的經(jīng)濟效益,因此,,對生產者有很大的吸引力,。畜牧業(yè)中使用孕激素類藥物(非治療用途)已有很長的歷史,但人類長期食用含有激素的肉制食品,,即使含量甚微,,亦會明顯影響機體的激素平衡,而且有致癌危險,,對幼兒造成發(fā)育異常等危害,。因此,開發(fā)一種能檢測孕酮殘留量的方法是十分必要的。本文采用液相色譜法對牛和豬脂肪樣品中的孕酮進行檢測.

1 試劑與儀器

1.1 試劑 醋酸美侖孕酮,、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品,,乙腈,甲醇,,乙酸乙酯,,其他試劑為分析純。水由凈化系統(tǒng)制得,。

 ?。ǎ保藴蕛湟海海保埃埃唉蹋纾恚欤謩e準確稱取0.05g 醋酸美侖孕酮,、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品于50ml容量瓶中,,用甲醇定容。于4℃保存,,可使用一年,。

  (2)混合中間溶液I:100μg/ml,,分別吸取10.0ml 醋酸美侖孕酮,、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準儲備液于100ml 容量瓶中,用甲醇定容,。于4℃保存,,可使用一年。

 ?。ǎ常┗旌现虚g溶液II:1.0μg/ml,,取1.00ml 混合中間溶液I于100ml 容量瓶中,,用甲醇定容,。于4℃保存,可使用半年,。

(4)混合標準工作液:分別吸?。保啊ⅲ玻?、40,、80、100μl 混合中間溶液II 添加到980,、970,、950、910,、890μl 的乙腈-水(65:35)中,再加入10μl 0.2%鹽酸溶液,,混勻,,得到濃度為0.010μg/ml,、0.020μg/ml、0.040μg/ml,、0.080μg/ml 和0.10μg/ml 混合標準工作液,,供液相色譜測定,當日使用,。

1.2 儀器 LC7000 液相色譜系統(tǒng),,LC7011泵體,LC7020 紫外-可見檢測器,,Hanon-Clarity色譜軟件,。氮吹儀;海能全自動固相萃取裝置,;低溫離心機,;渦旋混勻器;CN 固相萃取柱,。

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