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DMEM 高糖 不含HEPES 細胞培養(yǎng)

DMEM 高糖 不含HEPES 細胞培養(yǎng)

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,，高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,，適于生長較快,、附著較困難腫瘤細胞等,。該類培養(yǎng)基廣泛應用于疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養(yǎng)及單一細胞培養(yǎng);如A9,、3T6,、BALB/3T3、COS-1,、COS-3,、COS-7、L6,、WEHI-3b等細胞系的培養(yǎng),。

DMEM培養(yǎng)基的成分

DMEM培養(yǎng)基的配制方法：

1 制備新鮮三蒸水或Millipore超純水,。

2 稱取所需量的干粉培養(yǎng)基，加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個包裝的培養(yǎng)液,，在將整個包裝的干粉倒入三蒸水后,，需用水洗包裝袋內(nèi)面2次，倒入培養(yǎng)液中,，以保證所有干粉都溶解成培養(yǎng)液,。磁力攪拌或人工攪拌使之*溶解。

3 根據(jù)包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據(jù)實驗需要,，添HEPES(5-20mmol/L),、谷氨酰胺和其他特殊物質(zhì)。

4 加水定容到終體積,。

5 必要時用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH,。

6 用無菌0.22um濾膜過濾除菌，分裝于無菌血清瓶中,，4℃冰箱保存,。

配制好的培養(yǎng)液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL鏈霉素，并根據(jù)需要加入血清(5%-20%),。

DMEM培養(yǎng)基的特點：

（1）氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等,；

（2）維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍,；

（3）含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸；

（4）含有微量的鐵離子,。

DMEM培養(yǎng)基應用廣泛,。基于DMEM培養(yǎng)基中氨基酸,、微生物含量豐富,，并具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe離子，因此在細胞培養(yǎng),、疫苗生產(chǎn)等方面的應用為常見,。