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P8770-200-Solarbio 豬外周血淋巴細(xì)胞分離液
  • P8770-200-Solarbio 豬外周血淋巴細(xì)胞分離液

貨物所在地:北京北京市

地: 北京市通州區(qū)馬駒橋鎮(zhèn)聯(lián)東U谷中

更新時(shí)間:2025-02-10 21:00:21

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Solarbio 豬外周血淋巴細(xì)胞分離液
1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染,。
2. 細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,,需待 溶液溫度升室溫時(shí),,搖勻后使用,。
3. 整個(gè)分離過(guò)程中,溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無(wú)菌環(huán)境 下,,避免微生物的污染,,否則會(huì)影響分離質(zhì)量。

Solarbio 豬外周血淋巴細(xì)胞分離液
貨號(hào) :P8770
規(guī)格 :200ml
保存 :室溫避光儲(chǔ)存,,有效期少 2 年,。


產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
    本分離液為Ficoll、淀粉550與泛影酸葡jia胺的混合液,??鼓庵苎稍诜蛛x液中分層。離心時(shí),,在Ficoll,、淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降;此時(shí),,淋巴細(xì)胞及其他單個(gè)核細(xì)胞仍處于分離液上層,,紅細(xì)胞污染可忽略不計(jì)。大部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過(guò)程中去除。 其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液,,因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,,用戶在制定分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物種屬及被分離細(xì)胞的名稱,。
   適用于從豬抗凝血液中分離淋巴細(xì)胞,,無(wú)菌條件下所分離的淋巴細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)等。本品僅供科研使用,。


注意事項(xiàng) :
    A.本實(shí)驗(yàn)要求,,在正常大氣壓下,分離液,、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃,。分離液在低溫時(shí)呈較高密度,在高溫時(shí)呈較低密度,。細(xì)胞分離液從冰箱取出后,,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃,。為獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,好在取血后2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,血液提取后存放時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越低,。
    B.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞,,不可使用含Ca,、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,,大大降低細(xì)胞得率及純度,。
    C.優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸,、肝素,,其他抗凝劑也可使用,但會(huì)影響細(xì)胞活性,。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中去除抗凝劑體積,。
    D.實(shí)驗(yàn)操作時(shí),不可使用含粉手套,、不可使用內(nèi)毒素含量過(guò)高的液體,,手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會(huì)激活淋巴細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性。
    E.本實(shí)驗(yàn)不可使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,,其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁影響分離效果,。推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管。
    F.吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜,。
    G.如需進(jìn)行B,、T細(xì)胞計(jì)數(shù),則需血液貯藏時(shí)間不得多于10小時(shí),,否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活,,得率降低。
    H.為去除所混雜的血小板,,可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心,。
    I.細(xì)胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定,細(xì)胞活性可用臺(tái)盼藍(lán)處理后觀察,。
    J.由于各品牌離心機(jī)的性能不同,,國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時(shí)間,,摸索的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。

 

分離方法 :
一,、當(dāng)血液樣本小于3ml時(shí),,實(shí)驗(yàn)方法如下:
    1. 取一支15ml離心管,加入3ml分離液置于18-22℃復(fù)溫,。
    2. 將血液樣本小心加于分離液之液面上,。18-22℃,400g離心20分鐘,。低溫(如4℃)離心會(huì)降低細(xì)胞得率,。
    3. 離心后,用吸管小心吸出分離液上層(包含淋巴細(xì)胞的細(xì)胞層)0.5cm以上的上清液部分,,棄去,。
    4. 用吸管小心吸取分離液層及淋巴細(xì)胞層于另一新離心管內(nèi)。
    5. 在步驟4中所得離心管中加入10ml PBS緩沖液或HBSS緩沖液混勻,。
    6. 250g離心10分鐘,。
    7. 棄上清。
    8. 用吸管以5ml PBS緩沖液或HBSS緩沖液重懸所得細(xì)胞,。
    9. 250g離心10分鐘,。
    10. 棄上清。重復(fù)步驟7,、8,、9,后以0.5ml后續(xù)試驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞,。
二,、當(dāng)血液樣本大于3ml時(shí),實(shí)驗(yàn)方法如下:
    1. 當(dāng)血液樣本粘度過(guò)高或血液樣本大于等于3ml時(shí),優(yōu)稀釋方法:將血液于18-22℃以250g離心10分鐘,,棄去血漿,,補(bǔ)充添加生理鹽水,添加量為所棄去血漿體積的1.5-2倍,,混勻備用,。注:不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。
    2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,,加入分離液(加入量與稀釋后的血液樣本體積相等),,置于18-22℃復(fù)溫。
    3. 將經(jīng)稀釋處理的血液樣本小心加于分離液之液面上,。18-22℃,,400g離心20分鐘。低溫(如4℃)離心會(huì)降低細(xì)胞得率,。注:加入血液樣本后,,樣本及分離液總體積不得超過(guò)離心管總體積的三分之二。
   4. 剩余步驟同“情況一”中步驟3步驟10,。

 

產(chǎn)品性能指標(biāo) 

pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
無(wú)菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10µm 以上的不溶性微粒20 粒以下,,含25µm 以上的不溶性微粒5 粒以下
貯藏及保存期限 :
本分離液是敏光型的,應(yīng)在18℃-25℃避光保存,,有效期兩年,。啟封后置4℃保存,溶液變渾濁或污染細(xì)菌時(shí),,產(chǎn)品失效。保存溫度較低(10℃以下)時(shí)分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,,影響分離效果,。

 

Solarbio 豬外周血淋巴細(xì)胞分離液

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