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基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒
貨號：D6942
規(guī)格：100T
產品說明：
質粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,，大小從1-200kb不等,，為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,，并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中,。質粒主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中,，它具有自主復制和轉錄能力,，能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù)，并表達所攜帶的遺傳信息,。
質粒提取原理及流程：
較常用的質粒DNA提取方法有3種：堿裂解法,、煮沸法和去污劑(如Triton和SDS)裂解法。前兩種方法比較劇烈,，適用于較小的質粒(<15kb),。去污劑裂解法則比較溫和，一般用于分離大質粒(>15kb),。堿裂解法是一種應用為廣泛的制備質粒DNA的方法,，其原理為：染色體DNA比質粒DNA分子大得多，且染色體DNA為線狀分子,，而質粒DNA為共價閉合環(huán)狀分子,；當用堿處理DNA溶液時,，線狀染色體DNA容易發(fā)生變性，共價閉環(huán)的質粒DNA在回到中性即恢復其天然構象,；變性染色體DNA的片段與變性蛋白質和細胞碎片結合形成沉淀,，而復性的超螺旋質粒DNA分子則以溶解狀態(tài)存在液相中，離心去除沉淀后,，就可從上清中回收質粒DNA。目前,，市面上質粒提取試劑盒大多數(shù)都是采取上述的堿裂解方法,，不同之處在于純化方式。目前比較常用的純化系統(tǒng)是硅基質吸附材料,，其原理為在高鹽環(huán)境下質粒DNA能夠結合到硅基質上,，然后用低鹽緩沖液或水將質粒DNA從硅基質上洗脫下來。得到的質?？梢杂糜诿盖?、PCR、測序,、細菌轉化,、轉染等分子生物學實驗。
質粒鑒定與評價：
瓊脂糖電泳檢測
堿裂解法提取的質粒經瓊脂糖電泳進行鑒定時,，理想狀況是只出現(xiàn)超螺旋—條帶,，但在質粒提取過程中，由于機械力,、酸堿度,、試劑等原因，使質粒DNA鏈發(fā)生斷裂,，可能出現(xiàn)兩條帶或者出現(xiàn)三條帶,，這三條帶電泳遷移率從快到慢，分別是超螺旋,、開環(huán)和復制中間體(即沒有復制*的兩個質粒粘連在—起),。如果加溶液Ⅱ后過度振蕩，會在遠離這三條帶的位置出現(xiàn)條帶,，這條帶泳動得較慢,，是大腸桿菌基因組DNA的片段。非常偶然的是,，有時候提取的質粒會出現(xiàn)4個以上的條帶,，這是由于特殊的DNA序列導致了不同程度的超螺旋(超螺旋的圈數(shù)不同)所致。但是,，只要質粒經單酶切鑒定后,，只有單一條帶,，就證明沒有基因組的污染。酶切檢測質粒提取后,，為了進—步鑒定質粒的正確與否,，就要進行酶切鑒定，通過與Marker對比,，確定質粒的分子量大小,。用紫外線分光光度計檢測濃度測定標準為：OD 260 值為1相當于大約50ug/ml雙鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值1.7-1.9之間說明所得DNA純度較好,。OD 260 /OD 280 比值若低于1.7說明可能有蛋白污染,。OD 260 /OD 280 比值若高于2.0則說明DNA有可能已降解。如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,，而使用去離子水,，比值會偏低，因為pH值和離子濃度會影響光吸收值,，但并不表示純度低,。
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基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒訂購說明：
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基因組提取試劑盒 質粒提取試劑盒運輸說明：
1,、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,，再用泡沫盒密封,，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子,，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩(wěn)定如一,，為您的實驗保駕護航,。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸,。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封,，用膠帶嚴實密封泡沫盒,，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中,，保證產品的性質穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航,。
3,、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中,。
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