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更新時(shí)間:2024-08-26 09:56:45瀏覽次數(shù):1312評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
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貨號(hào) | BC2155 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法
測(cè)定意義:CA是生物體內(nèi)常見(jiàn)的有機(jī)酸,,是重要的食品風(fēng)味物質(zhì),。此外,CA是三羧酸循環(huán)*步反應(yīng)的產(chǎn)物,。
測(cè)定原理:酸性條件下,,檸檬酸還原Cr6+生成Cr3+,,在545nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加,,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量,。
需要的儀器,耗材:低溫離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液槍,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水,。
檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法
操作步驟:一,、樣品中檸檬酸提取: 1. 液體樣品中檸檬酸提?。喝?0.1mL 液體加試劑一 0.9mL,,充分混勻,11000g,, 4℃離心 10min,,取上清液,待測(cè),。 2. 組織中檸檬酸提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,。11000g,,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(cè),。 3. 線粒體中檸檬酸提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,,600g/min,,4℃離心 5min;取上清另一 EP 管中,,11000g,, 4℃離心 10min,棄上清(此上清液可用于細(xì)胞質(zhì) CA 含量測(cè)定),;向沉淀中加試劑二 200μl,,以及試劑三 2μl,充分懸浮溶解,,11000g,,4℃離心 10min,,取上清液,待測(cè),。 4. 細(xì)菌,、真菌中:按照細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,,超聲 3 秒,,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min),; 11000g,,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(cè),。二,、測(cè)定操作: 1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 545 nm,,蒸餾水調(diào)零,。 2. 試劑一置于 30℃水浴中預(yù)熱 30min。 3. 空白管:取 0.5 mL EP 管,,依次加入 20μL 蒸餾水,,140μL 試劑一,20μL 試劑四,,20μL 試劑五,,混勻后室溫靜置 30min,于 545nm 測(cè)定吸光度,,記為 A 空白管,。 4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 標(biāo)準(zhǔn)液,,140μL 試劑一,,20μL 試劑四,20μL 試劑五,,混勻后室溫靜置 30min,,于 545nm 測(cè)定吸光度,記為 A 標(biāo)準(zhǔn)管,。 5. 測(cè)定管:取 0.5 mL EP 管,,依次加入 20μL 上清液,140μL 試劑一,,20μL 試劑四,,20μL 試劑五,充分混勻后室溫靜置 30min,,于 545nm 測(cè)定吸光度,,記為 A 測(cè)定管,。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
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