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纖維素酶（CL）測定試劑盒  微量法

操作步驟：

一、樣品測定的準備：

1,、細菌或細胞：收集細菌或細胞到離心管內,，離心后棄上清；按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,，超聲冰浴破碎細菌或細胞（功率 20％,，超聲 3S 秒，間隔 10S,，重復 30 次）,；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測,。

2,、組織：稱取約 0.1g 組織加入 1mL 提取液，冰浴中勻漿,。8000g ,，4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。

二、加樣表和測定步驟：試劑名稱（μL） 對照管 測定管 標準管試劑一 50 50 - 試劑二 200 200 - 雙蒸水 50 50 - 樣本 50 - 煮沸的樣本 50 - 混勻,，40℃準確水浴 30min,，取出后立即放入沸水中煮沸 15min,得糖化液 混勻，540nm 處蒸餾水調零,，測定吸光值 A,，樣品管計算ΔA=A 測定管-A 對照管。標準曲線的建立：540nm 處蒸餾水調零,，讀標準管吸光值 A,。以濃度（y）為縱坐標，吸光度 A（x）為橫坐標建立標準曲線,。

纖維素酶（CL）測定試劑盒  微量法

CL 活力計算：根據標準曲線,，將ΔA 帶入公式中（x）計算樣品濃度 y（mg/mL）。 1,、按照蛋白濃度計算單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產生 1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位,。 CL 活力（U /mg prot）＝1000×y×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T=233×y÷Cpr 2、按樣本鮮重計算單位的定義：每 g 組織在反應體系中每分鐘催化產生 1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位,。 CL 活力（U/g 鮮重）＝1000×y×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T =233×y÷W 3,、按細菌或細胞密度計算單位的定義：每1萬個細菌或細胞在反應體系中每分鐘催化產生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。 CL 活力（U/10 4 cell）＝1000×y×V 反總÷（500×V 樣÷V 樣總）÷T =0.467×y 1000：1mg/mL=1000ug/mL,；V 反總：反應體系總體積,，0.35mL； V 樣：加入樣本體積,， 0.05 mL,；V 樣總：加入提取液體積，1 mL,；T：反應時間,，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度,， mg/mL,；W：樣本質量,，g；500：細菌或細胞總數,，500 萬,。

纖維素酶（CL）測定試劑盒  微量法

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存,；試劑一：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存；試劑二：液體 10mL×1 瓶,，4℃保存,；試劑三：液體 13mL×1 瓶，4℃保存,；標準品：粉劑×1 支,，4℃保存，含 10mg 無水葡萄糖（干燥失重<0.2%）,，臨用前加入 1ml 蒸餾水溶解,，配制成 10mg/ml 葡萄糖溶液備用，4℃可保存 1 周,，或者用飽和苯甲酸溶液溶解,，可保存更長時間,。