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土壤亞硝酸還原酶試劑盒 微量法

測(cè)定意義：土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,，參與亞硝酸鹽NO的還原反應(yīng),，它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,，為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù),。

測(cè)定原理：亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。

需要的儀器,，耗材:天平,、、研缽,、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋,、低溫離心機(jī),。

土壤亞硝酸還原酶試劑盒 微量法

測(cè)定操作：空白管 對(duì)照管 測(cè)定管風(fēng)干土樣（g） 0.1 0.1 蒸餾水（μL） 200 試劑一（μL） 200 200 試劑二（μL） 200 200 200 混勻后，25℃反應(yīng)1h 試劑三（μL） 200 200 200 充分震蕩30s,，1000rpm,，4℃，離心10min 上清液（μL） 500 500 500 工作液（μL） 1000 1000 1000 充分混勻,，室溫靜置顯色 10min,，用蒸餾水調(diào)零，于 1mL 玻璃比色皿中測(cè)定 540nm 各管吸光值,，分別記為 A 空白管,、A 對(duì)照管、A 測(cè)定管。

試劑一：液體10mL×1瓶,，4℃保存,。試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存,。臨用前加10mL蒸餾水溶解,。試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存,。試劑四：液體25mL×1瓶,，4℃避光保存。（使用前50℃加熱溶解）試劑五：液體25mL×1瓶,，4℃保存,。工作液：臨用前根據(jù)用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。