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細胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅
 

貨號   規(guī)格      備注
T1300  100ml       不含酚紅
T1320  100ml       含酚紅

產(chǎn)品說明 ：
    在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養(yǎng)中,，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液,。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA 等,，其功能主要是使細胞間的蛋白質(zhì)（如細胞外基質(zhì)）水解,，使組織或貼壁細胞分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗,。
    索萊寶生產(chǎn)的胰蛋白酶-EDTA 消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM）,，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過濾除菌,，可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化,。本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全,、細胞狀態(tài)好等特點,。通常室溫消化 2 分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚紅和不含酚紅 2 類產(chǎn)品,，酚紅具有 pH 指示作用,。
    保存：-20℃保存，有效期 12 個月,。

使用方法 ：
1. 貼壁細胞的消化：
     a) 吸去培養(yǎng)液,，用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,，以去除殘余的血清。
     b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液,，蓋過細胞即可,，室溫放置 1-2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同,，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間,。
     c) 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮,，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,，吹打下細胞,，即可直接用于后續(xù)實驗。
     d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,，可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化,。
     e) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞,，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘,，沉淀細胞,，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,，即可用于后續(xù)實驗,。
2. 組織的消化：
    不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜,。
 

相關文獻：

《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699

注意事項 ：
    1．由于組織或細胞性質(zhì)不同,，實驗人員應依據(jù)具體情況，確定消化時間,；消化細胞時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁和生長狀況；
    2．本產(chǎn)品不含抑菌劑,，在使用過程中要特別注意無菌操作,，避免消化液被微生物污染；
    3．不宜 4℃長期保存,，切忌反復凍融,，小量使用時建議分裝凍存；
    4. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

細胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅。