產(chǎn)品名稱: α-淀粉酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: α-amylase Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0610          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存,；            參考價格：450
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: α-淀粉酶檢測試劑盒|淀粉酶檢測試劑盒|α-淀粉酶|試劑盒

簡要介紹：
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,，生成葡萄糖,、麥芽糖、麥芽三糖,、糊精等還原糖,，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶,。
    還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),。β-淀粉酶不耐熱，在70℃鈍化15min,，從而測定α-淀粉酶活性,。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體40mL×1瓶，常溫保存,，若有黃色晶體析出,，需加熱溶解后再用；
試劑二：粉劑×1瓶,，4℃保存,。臨用前加入20mL蒸餾水,，置于常溫水中并加熱煮沸，期間不斷攪拌粉劑溶解,；
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支,，10mg無水葡萄糖。
產(chǎn)品說明：
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶,。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵，生成葡萄糖,、麥芽糖,、麥芽三糖、糊精等還原糖,，同時使淀粉的粘度降低,，因此又稱為液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖,，還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),，在540 nm有吸收峰,；通過測定540 nm吸光度增加速率,，計算淀粉酶活性。α-AL耐熱,，但是β-淀粉酶可在70℃鈍化15min,。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min，就只有α-AL能夠催化淀粉水解,。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計,、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī),、可調(diào)式移液器,、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水,。
操作步驟：
一,、粗酶液提取：
稱取約0.1g樣本,，加0.8mL蒸餾水勻漿,；勻漿后在室溫下放置提取15min，每隔5min振蕩1次,，使其充分提?。?/span>6000g,，常溫離心10min,，吸取上清液并加蒸餾水定容10 mL,，搖勻，即為淀粉酶原液,。
二,、測定步驟和加樣表：

1. 分光光度計或者酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長540nm,。
2. 將葡萄糖用蒸餾水稀釋為0.25,、0.125、0.0625,、0.03125,、0.015625、0.0078和0.0039 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。
3. 按操作表依次加入各試劑：

混勻,，90℃水浴10min,，蒸餾水調(diào)零，540nm處讀取對照管,、測定管,、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管吸光度,，分別記為A對照,、A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,，計算ΔA測定=A測定-A對照,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。
三,、α-淀粉酶活性計算：

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

以ΔA標(biāo)準(zhǔn)為y軸,，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，得到方程y=kx+b,。將
ΔA測定帶入方程得到x（mg/mL）。
2,、α淀粉酶活性的計算
（1）按照樣本質(zhì)量計算
單位定義：每g 組織每分鐘催化產(chǎn)生1mg 還原糖定義為1 個酶活力單位,。
α- 淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=x×V 樣÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T=2×x÷W
（2）按照蛋白質(zhì)含量計算
單位定義：每mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1mg 還原糖定義為1 個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= x×V 樣÷（V 樣×Cpr）÷T==0.2×x÷Cpr
（3）血清（漿）樣本中α-淀粉酶活性計算
單位定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1mg 還原糖定義為1 個酶活性單位,。
α-淀粉酶活性(mg/ml)= x÷T=0.2×x
V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積,，0.25 mL；V 樣總：提取液總體積,，10 mL,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；T：反應(yīng)時間,，5min,。
注意事項：
當(dāng)測定的吸光值大于1時，可以對樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測定,。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus)》 作者:QinYuan1ShangLin1YuanFuXi-RuiNieWenLiuYanSuQiao-HongHanLiZhaoQingZhangDe-RongLinWenQinDing-TaoWu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:3.909 PMID:30639655

α-淀粉酶活性檢測試劑盒