β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱: β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: β-glucosidase（β-GC） Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2560               產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣             產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存,；            參考價格：650
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: β-葡萄糖苷酶檢測試劑盒|β-GC檢測試劑盒|β-葡萄糖苷酶|試劑盒

簡要介紹：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，催化β-糖苷鍵水解,，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中，β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖,；β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味,；β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,，釋放HCN，從而防止昆蟲取食,。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚,，后者在400nm有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算β-GC活性,。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50ml×1瓶，4℃保存,。
試劑一：粉劑×2瓶,，-20℃保存；臨用前每瓶加入10ml雙蒸水,，充分溶解備用,；用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二：液體25ml×1瓶,，4℃保存,。
試劑三：液體80ml×1瓶，4℃保存,。  
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1ml×1支,，取1.5ml EP管加入1ml，5μmol/ml的對硝基ben酚溶液,。


產(chǎn)品說明：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，催化β-糖苷鍵水解,，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中,，β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài),。從而產(chǎn)生香味；β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,，釋放HCN,，從而防止昆蟲取食。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚,，后者在400nm有大吸收峰,，通過測定吸光值升高速率來計算β-GC活性。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
操作步驟：
一,、樣品的前處理：   

1. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清,；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液）,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W,，超聲3s,，間隔10s，重復(fù)30次）,；15000g 4℃離心10min,，取上清，置冰上待測,。
2. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿,。15000g 4℃離心10min,，取上清，置冰上待測,。

3,、標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備：取100μL標(biāo)準(zhǔn)液，加入到400μL試劑三中,，得到1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)液,，十倍稀釋到100nmol/ml,，倍比稀釋：50、25,、12.5,、6.25nmol/ml，稀釋液用試劑二,。100,、50、25,、12.5,、6.25nmol/ml做標(biāo)準(zhǔn)液。
二,、測定步驟：

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長400nm，蒸餾水調(diào)零,。
2. 加樣表

β- GC 活力單位的計算： 
1,、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（y）和吸光度（x），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
2,、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA（x）帶入公式計算樣品產(chǎn)物濃度（nmol/ml）,。
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/mg prot)=(y×V反總)÷(V樣×Cpr)÷T=20×y÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒,。
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/g鮮重) = (y×V反總)÷(W×V樣÷V樣總)÷T=20×y÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/10⁴ cell)=(y×V反總)÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.04×y
Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml,；V反總：反應(yīng)體系總體積,，1ml；V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積,，0.1ml,；V樣總：加入提取液體積，1ml,；W：樣品質(zhì)量,，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),，500萬,；T：反應(yīng)時間，0.5h,。

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相關(guān)文獻(xiàn)：
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