目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測試劑盒>>生化試劑盒>> BC2560β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/24樣 |
---|---|---|---|
貨號 | BC2560 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測 |
β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存,; 參考價格:650
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: β-葡萄糖苷酶檢測試劑盒|β-GC檢測試劑盒|β-葡萄糖苷酶|試劑盒
簡要介紹:
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,,催化β-糖苷鍵水解,,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖,;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味,;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,,釋放HCN,從而防止昆蟲取食,。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚,,后者在400nm有大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算β-GC活性,。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50ml×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×2瓶,,-20℃保存;臨用前每瓶加入10ml雙蒸水,,充分溶解備用,;用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二:液體25ml×1瓶,,4℃保存,。
試劑三:液體80ml×1瓶,4℃保存,。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1ml×1支,,取1.5ml EP管加入1ml,5μmol/ml的對硝基ben酚溶液,。
產(chǎn)品說明:
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,,催化β-糖苷鍵水解,,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài),。從而產(chǎn)生香味;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,,釋放HCN,,從而防止昆蟲取食。
β-GC分解對-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚,,后者在400nm有大吸收峰,,通過測定吸光值升高速率來計算β-GC活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
操作步驟:
一,、樣品的前處理:
3,、標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備:取100μL標(biāo)準(zhǔn)液,加入到400μL試劑三中,,得到1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)液,,十倍稀釋到100nmol/ml,,倍比稀釋:50、25,、12.5,、6.25nmol/ml,稀釋液用試劑二,。100,、50、25,、12.5,、6.25nmol/ml做標(biāo)準(zhǔn)液。
二,、測定步驟:
試劑名稱(μl) | 對照管 | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
試劑一 | 400 | ||
試劑二 | 500 | 500 | |
樣本 | 100 | 100 | |
迅速混勻,,放入37℃準(zhǔn)確水浴30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(蓋緊,,以防止水分散失),,流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變) | |||
試劑一 | 400 | ||
充分混勻,8000g,,4℃,,離心5min,取上清液 | |||
上清液 | 500 | 500 | |
標(biāo)準(zhǔn)液 | 500 | ||
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混勻,,室溫靜置2min后,,用對照管調(diào)零,400nm處測定吸光值A(chǔ),,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管,。 |
β- GC 活力單位的計算:
1,、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y)和吸光度(x),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
2,、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA(x)帶入公式計算樣品產(chǎn)物濃度(nmol/ml),。
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/mg prot)=(y×V反總)÷(V樣×Cpr)÷T=20×y÷Cpr
需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒,。
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/g鮮重) = (y×V反總)÷(W×V樣÷V樣總)÷T=20×y÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每ml每小時產(chǎn)生1nmol對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位,。
β-GC活力(U/104 cell)=(y×V反總)÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.04×y
Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml,;V反總:反應(yīng)體系總體積,,1ml;V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,,0.1ml,;V樣總:加入提取液體積,1ml,;W:樣品質(zhì)量,,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),,500萬,;T:反應(yīng)時間,0.5h,。
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相關(guān)文獻(xiàn):
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