谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

產品英文名:  Glutamate Synthase（GOGAT）Assay Kit

產品貨號：BC0070      產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規(guī)格：50管/48樣        產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：900
庫存狀態(tài)：現貨                          
關鍵字:  谷氨酸合成酶檢測試劑盒|GOGAT檢測試劑盒|谷氨酸合成酶|試劑盒

簡要介紹：
GOGAT分布于植物中,，和谷氨酰胺合成酶共同構成GS/GOGAT循環(huán),，參與氨同化的調控。
    GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉移到α-酮戊二酸,，形成兩分子的谷氨酸,；同時NADH氧化生成NAD+，340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小,。

產品詳細描述
產品內容：
提取液：液體60ml×1瓶,，4℃保存；
試劑一：液體60ml×1瓶,，4℃保存,；
試劑二：粉劑×1支，4℃保存,；
試劑三：粉劑×1支,，4℃保存；
試劑四：粉劑×1支,，-20℃保存,。
產品說明：
GOGAT分布于植物中，和谷氨酰胺合成酶共同構成GS/GOGAT循環(huán),，參與氨同化的調控,。
GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉移到α-酮戊二酸，形成兩分子的谷氨酸,；同時NADH氧化生成NAD⁺,，340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計,、臺式離心機,、水浴鍋、可調式移液器,、1ml石英比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。

操作步驟：
一,、粗酶液提取：   
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清,；按照細菌或細胞數量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml提取液）,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W,，超聲3s,，間隔10s，重復30次）,；8000g 4℃離心10min,，取上清，置冰上待測,。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿,。8000g 4℃離心10min,，取上清，置冰上待測,。  
二,、測定步驟：

1. 分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長340nm,，蒸餾水調零,。
2. 樣本測定

（1）工作液的配制：臨用前將試劑二、三,、四轉移到試劑一中混合溶解,，置于37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min；現配現用,。
（2）取1ml工作液和0.1ml樣本于1ml比色皿中,，混勻，加樣本的同時開始計時,，在340 nm波長下記錄20秒時的初始吸光度A1和5分20秒時的吸光度A2，計算ΔA=A1-A2,。
GOGAT活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
GOGAT（U/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×10⁹]÷(V樣×Cpr) ÷T=354×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
GOGAT（U/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×10⁹]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=354×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位,。
GOGAT（U/10⁴ cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×10⁹]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.708×ΔA
V反總：反應體系總體積,，1.1×10^-3 L；ε：NADH摩爾消光系數,，6.22×10³ L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積,，0.1 ml,；V樣總：加入提取液體積，1 ml,；T：反應時間,，5 min；Cpr：樣本蛋白質濃度,，mg/ml,；W：樣本質量，g,；500：細菌或細胞總數,，500萬。

相關文獻：

《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Altered gut microbiota and mucosal immunity in patients with schizophrenia.》 作者:Ruihuan Xua,Bingbing Wu,Jingwen Liang,Fusheng He,Wen Gu,Kang Li,Yi Luo,Jianxia Chen,Yongbo Gao,Ze Wu,Yongqiang Wang,Wenhao Zhou,Mingbang Wang 期刊:Brain Behav. Immun. 影響因子:6.17 PMID:31255682

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒