目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測試劑盒>>生化試劑盒>> BC0270土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/24樣 |
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貨號 | BC0270 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 土壤中性蛋白酶活性檢測 |
土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒
土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
英文名稱:Soil neutral protease activity detection kit
產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
注意:正式測定之前選擇2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,。
貨號:BC0275
規(guī)格:100T/48S
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存,;
參考價格:1380
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞:土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性檢測|蛋白酶活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體20mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,,4℃保存,;臨用前加入10mL試劑一,沸水浴攪拌溶解后待用,;
試劑三:粉劑×1 瓶,,4℃保存;臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用,;
試劑四:液體20mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑五:液體5mL×1 瓶,,4℃保存,;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液,,4℃保存,。
產(chǎn)品說明:
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化,,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一,。土壤中性蛋白酶在中性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機(jī)質(zhì)含量,、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān),。中性條件下,土壤中性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸,;在堿性條件下,,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán),在680nm 有特征吸收峰,。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、可調(diào)式移液槍,、微量比色皿/96孔板、甲苯,、蒸餾水,、50目篩(或更小),。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,,過30~50 目篩。
操作步驟:
1,、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,,調(diào)節(jié)波長680nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、樣本測定:
試劑名稱 測定管 對照管 標(biāo)準(zhǔn)管 空白管
風(fēng)干土樣(g) 0.05 0.05 - -
試劑一(μL) 50 50 - -
試劑二(μL) 100 - -
混勻后,,37℃反應(yīng)24h,期間振蕩5-6 次,,使土樣與反應(yīng)液充分接觸,。
試劑三(μL) 100 100 - -
試劑二(μL) - 100 - -
混勻,10000rpm 室溫離心10min,,取上清液
上清液(μL) 44 44 - -
標(biāo)準(zhǔn)液(μL) - - 44 -
蒸餾水(μL) - - - 44
試劑四(μL) 130 130 130 130
試劑五(μL) 26 26 26 26
混勻,,40℃水浴10min,10000rpm 室溫離心10min,,取上清液于680nm 下讀取各管吸光值A(chǔ),,分別記為A 測定管、A 對照管,、A 標(biāo)準(zhǔn)管,、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,,ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管,。
注意:標(biāo)準(zhǔn)管、空白管只需測一次,。每個測定管設(shè)一個對照管,。
土壤中性蛋白酶活性計算:
單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol 酪氨酸為一個土壤中性蛋白酶活力單位。土壤中性蛋白酶(U/g)=C標(biāo)準(zhǔn)×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×V 反總÷W÷T= 0.05×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W,。
C 標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,,0.2 μmol/mL;
V 反總:反應(yīng)體系總體積,,0.25mL,;
T:反應(yīng)時間,1d,;
W:樣本質(zhì)量,,g。
注意事項(xiàng):
1,、當(dāng)吸光值大于1.5時,,建議將上清液稀釋后進(jìn)行測定,計算時注意乘以稀釋倍數(shù),。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影響因子:2.914 PMID:29860689
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