目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標檢測試劑盒>>生化試劑盒>> BC1460谷氨酸脫氫酶（GDH）活性檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BC1460 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 谷氨酸脫氫酶(GDH)活性檢測 |
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣 產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：650
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵字: 谷氨酸脫氫酶檢測試劑盒|GDH檢測試劑盒|谷氨酸脫氫酶|試劑盒
簡要介紹：
GDH（EC 1.4.1.2）廣泛分布于植物中,，和谷氨酸合成酶（GOGAT）共同參與谷氨酸的合成,，在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機氮化合物的代謝中起重要作用。
GDH催化NH4+,、α-酮戊二酸和NADH,，生成谷氨酸和NAD+，引起340nm吸光度下降,。通過測定340nm吸光度的下降速率，計算GDH活性,。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體60mL×1瓶,，4℃保存；
試劑一：液體60mL×1瓶,，4℃保存,；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存,。
產(chǎn)品說明：
GDH（EC 1.4.1.2）廣泛分布于植物中,，和谷氨酸合成酶（GOGAT）共同參與谷氨酸的合成，在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機氮化合物的代謝中起重要作用,。
GDH催化NH4+,、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+,，引起340nm吸光度下降,。通過測定340nm吸光度的下降速率，計算GDH活性,。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計,、臺式離心機、水浴鍋,、移液器,、1mL石英比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
操作步驟：
一,、粗酶液提取：
1,、收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％,，超聲3秒，間隔10秒,，重復30次）,；8000g4℃離心10分鐘，取上清,，置冰上待測,。
2、稱取約0.1g組織,，加入1mL提取液進行冰浴勻漿,。8000g 4℃離心10分鐘，取上清,，置冰上待測,。
二、測定步驟：
（1）工作液的配制：臨用前將試劑一加入試劑二中混合溶解,，置于37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min,；
（2）取1mL工作液和0.05mL樣本于光徑為1cm的1mL石英比色皿中，混勻,，加樣本的同時開始計時,，在340 nm波長下記錄20秒時的初始吸光度A1和5分20秒時的吸光度A2，計算ΔA=A1-A2,。注：當ΔA大于0.5時,，將樣本進行稀釋后測量。
三,、GDH活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位,。
GDH（U/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V樣) ÷T=675×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。
GDH（U/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣÷V樣總×W)÷T=675×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位,。
GDH（U/104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣÷V樣總×500)÷T=1.35×ΔA
V反總：反應體系總體積,，1.05×10-3 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑,，1cm；V樣：加入樣本體積,，0.05 mL,；V樣總：加入提取液體積，1 mL,；T：反應時間,，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣品質(zhì)量，g,；500：細菌或細胞總數(shù),，500萬。
相關文獻：
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
谷氨酸脫氫酶(GDH)活性檢測試劑盒
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