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羊外周血淋巴細胞分離液
【預(yù)期用途】
適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞(主要為淋巴細胞),,無菌條件下所
分離的細胞可用于免疫學(xué)檢測,。
羊外周血淋巴細胞【檢驗原理】
外周血中單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞等細胞,,其體積,、形態(tài)和密度
與其他細胞不同,紅細胞和白細胞等細胞密度較大,,為 1.090 g/ml 左右,,而淋
巴細胞和單核細胞密度為 1.075~1.090 g/ml,血小板為 1.030~1.035 g/ml,。
為此,,本公司將葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合,調(diào)整比重,、
pH 值和滲透壓,,經(jīng)過澄清及除菌過濾后制成一種密度在 1.077g/ml 并且近于等
滲的溶液(分層液),經(jīng)過密度梯度離心使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布,,
從而將各種血細胞加以分離,。
【檢驗方法】
取新鮮抗凝血 1ml,與注射用生理鹽水 1:1 混勻后,,小心加于 2ml 的細胞分
離液之液面上,,以 400g 離心(半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子)20 分鐘,此時離心管中由上
下細胞分四層,。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞,。第三層為透
明分離液層,。第四層為紅細胞層。收集第二層細胞放入含注射用生理鹽水 4-5
毫升的試管中,,充分混勻后,, 400g,離心 20 分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗 2 次即得所需
細胞,。(此方法效果較好,,推薦使用)
【主要組成成份】
本品為帶有乳光或微乳光的注射水溶液,主要組成成份是葡聚糖(右旋糖酐)
與泛影酸葡甲胺,。
【儲存條件及有效期】
18-25℃避光保存,,有效期 2 年。啟封后置 4℃保存,,有效期 1 周,。本品為
真空包裝,未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,,影響分離效果,。
【適用儀器】
半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子離心機。
【樣本要求】
本分離液要求血液為新鮮的抗凝血,,血液收集時應(yīng)無菌操作且在儲存,、處理
和運輸過程中避免冷凍和冷藏。
【參考值(參考范圍)】
收集淋巴細胞的純度大于 80%,。
【檢驗結(jié)果的解釋】
由于各品牌離心機的性能不同,,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能
影響分離效果,,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心的時間,,摸索佳的分離條件(具
體分離條件各實驗室自定)。
【檢驗方法的局限性】
本試驗要求,,在正常大氣壓下,,樣本、分離液及分離環(huán)境溫度為 20℃± 2℃,。
本分離液在低溫時呈較高密度,,在高溫時呈較低密度