18℃-25℃避光保存,,有效期兩年,。啟封后置4℃保存,,有效期一周,。
注:若保證無微生物污染,,啟封后可置4℃長期保存,。但應(yīng)注意保存溫度較低時本分離液易 出現(xiàn)白色結(jié)晶,,影響分離效果,。
一,、 分離方法說明及圖例
A.取1ml新鮮抗凝血,與全血及組織稀釋液1:1 混勻后小心加于1份本分離液之液面上,;
B. 以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心25分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子),。
此時離心管中由上下細(xì)胞分四層。*層,;為血漿層,。第二層;為環(huán)狀乳白色的白細(xì)胞層,。第三層,;為
略帶混濁的分離液層(富集一定量的白細(xì)胞),。第四層;為紅細(xì)胞層,。棄去*層血漿層,,收集第二層細(xì)
胞、第三層分離液層和第四層紅細(xì)胞層,,放入含細(xì)胞洗滌液10ml的試管中,,充分混勻后,以500g約(1800
轉(zhuǎn)/分)離心30分鐘,。沉淀經(jīng)1次洗滌后用紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞,,再經(jīng)3次洗滌去除紅細(xì)胞內(nèi)溶物和碎片
后取沉淀細(xì)胞即為所需白細(xì)胞
注: 提取率約為80%。
二,、 注意事項
A. 本分離液是敏光型的,,在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)在18℃-25℃避光保存,啟封后置4℃保存避免微生物污染,。另外,,本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,,影響分離效果,。
B. 待分離的樣本要求新鮮,避免冷凍和冷藏,。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復(fù)溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果好,,且所有操作過程一定要在無菌條件下進(jìn)行。
C. 由于各品牌離心機(jī)的性能不同,,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),,調(diào)節(jié)離心的時間,摸索佳的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定),。
D. 好使用無靜電反應(yīng)的離心管,,推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
E. 優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA,、枸櫞酸,、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑體積,。
三,、產(chǎn)品性能指標(biāo)
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下