產(chǎn)品名稱:：  乙酰膽堿酯酶(AchE)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Acetylcholinesterase(AchE) Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2020              產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣            產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存,；            參考價格：180
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關鍵字:  乙酰膽堿酯酶檢測試劑盒|AchE檢測試劑盒|乙酰膽堿酯酶|試劑盒

簡要介紹：
AchE是一種絲氨酸水解酶，廣泛存在于各種動物組織和血清中,。在神經(jīng)突觸間隙中AchE通過催化水解神經(jīng)遞質乙酰膽堿（Ach）來維持神經(jīng)沖動的正常傳遞,，在生物神經(jīng)傳導中起重要作用。
    AchE催化Ach生成膽堿,，膽堿與二硫對硝基ben甲酸（DTNB）作用生成5-巰基-硝基ben甲酸（TNB）,，TNB在412nm處有吸收峰，通過測定TNB的生成量,，即可計算出AchE的活性,。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內容：
提取液：液體25mL×1瓶,，4℃保存。
試劑一：液體55mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存,。臨用前加入5.2mL試劑一,，充分震蕩溶解。
試劑三：粉劑×1瓶,，4℃保存,。臨用前加入5.2mL試劑一，充分震蕩溶解,。
試劑四：粉劑×1瓶,，4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水溶解備用,。
產(chǎn)品說明：
乙酰膽堿酯酶（AchE）屬于絲氨酸水解酶,，廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰膽堿（Ach）水解,，在神經(jīng)傳導調節(jié)中起重要作用,。
AchE催化Ach水解生成膽堿，膽堿與二硫對硝基ben甲酸（DTNB）作用生成5-巰基-硝基ben甲酸（TNB）,；TNB在412nm處有吸收峰,，通過測定412 nm吸光度增加速率，計算AchE活性,。
自備儀器和用品：
可見分光光度計,、低溫離心機、水浴鍋,、可調式移液槍,、1mL玻璃比色皿，研缽/勻漿器,，蒸餾水。
操作步驟：

• 粗酶液提取：
• 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿,，8000g 4℃離心10min，取上清液待測,。
• 細菌,、真菌：按照細胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w,，超聲3秒,，間隔7秒,，總時間3min）；然后8000g,，4℃,，離心10min，取上清置于冰上待測,。
• 血清等液體：直接測定,。
• 測定操作：
• 可見分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到412 nm,，蒸餾水調零,。
• 操作表：

• AchE活性計算公式：
• 組織AchE活性
• 按照蛋白濃度計算

活性單位定義：每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol TNB為1個酶活單位。
AchE酶活(U/mg prot)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹] ÷（Cpr ×V樣×V上清÷V酶促）÷T
                   = 2255×ΔA ÷Cpr,。

1. 按照樣本質量計算

活性單位定義：每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol TNB為1個酶活單位,。
AchE酶活(U/g鮮重)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（W ×V樣÷V樣總×V上清÷V酶促）÷T
                  = 2255×ΔA÷W。

1. 細菌,、細胞AchE活性

活性單位定義：每10⁴個細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol TNB為1個酶活單位,。
AchE酶活(U/10⁴ cell)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（細胞數(shù)量×V樣÷V樣總×V上清÷V酶促）÷T
= 2255×ΔA÷細胞數(shù)量

1. 血清AchE活性

活性單位定義：每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol TNB為1個酶活單位。
AchE酶活(U/mL)= [ΔA÷ε÷d×V顯色×10⁹]÷（V樣×V上清÷V酶促）÷T =2255×ΔA
ε：TNB摩爾消光系數(shù),，13.6×10³ L/mol/cm,；V顯色：顯色反應體系總體積（L），1 mL=0.001 L,；10⁹：1mol=1×10⁹nmol,；V酶促：酶促反應總體積，0.23mL,；V上清：吸取上清液體積,，0.05mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量,，g,；V樣：加入樣本體積（mL），0.03 mL,；T：反應時間,，5min；細胞數(shù)量：提取時的細胞數(shù)量,，萬個,。
注意事項：
1.測定過程中樣本和工作液在冰上放置，以免變性和失活,。
2.當吸光值大于1時,，建議將樣本稀釋后測定。

相關文獻：
《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu Han,，Yemeng Yang,，Jinglin Gao，Dongxiang Zhao,，Chengcai Ren,，Shijie Wang，Shan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影響因子:2.46 PMID:30874992
《Neuroprotective effects of cordycepin inhibit Aβ-induced apoptosis in hippocampal neurons》 作者:Hao Song,Li-Ping Huang,Yuping Li,Chao Liu,Songhua Wang,Wei Meng,Shanshan Wei,Xin-Ping Liu,Yanchun Gong,Li-Hua Yao 期刊:NeuroToxicology 影響因子:3.263 PMID:30031108
《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu  期刊:Scientific Reports 影響因子:4.011 PMID:29535326

 

乙酰膽堿酯酶(AchE)活性檢測試劑盒