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Masson 三色染色試劑盒

Masson 三色染色是結(jié)締組織染色知更鳥經(jīng)典的一種方法，是顯示組織中纖維的主要方法之一,，是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法,。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密,、滲透性低的組織,；而大分子量則只能進入結(jié)構(gòu)稀松的、滲透性高的組織,。然而,，淡綠或苯胺藍的分子量很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色,，膠原纖維呈綠色或藍色,，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

Masson試劑盒的特點：◆染色穩(wěn)定,；◆分化時間短,，1-2分鐘；◆色彩清楚鮮艷,；◆使用范圍廣,，適宜于組織的石蠟切片,、冰凍切片等染色；◆所染切片保存時間長且不易褪色,。

產(chǎn)品組成：

試劑（A-1） 蘇木素染色液 25ml

試劑（A-2） 三氯化鐵水溶液 25ml

試劑（B） 鹽酸乙醇分化液 50ml

試劑（C） 氨水水溶液 50ml

試劑（D） 麗春紅酸性品紅染色液 50ml

試劑（E） 乙酸水溶液 50ml

試劑（F） 磷鉬酸水溶液 50ml

試劑（G） 苯胺藍染色液 50ml

注：臨用時取A1,、A2等量混合，成為試劑A,，不可預(yù)先配制后放置,，因染色液的色素根與鐵會化合。形成不容性沉淀,，等量混合后,，一般24小時后失去人力。

主要成分：

試劑（A）:主要由蘇木素和三氯化鐵組成,。

試劑（B）:主要由乙醇和鹽酸水溶液組成,。

試劑（C）:主要由稀氨水水溶液組成。

試劑（D）:主要由麗春紅和酸性品紅組成,。

試劑（E）:主要由乙酸水溶液組成,。

試劑（F）:主要由磷鉬酸水溶液組成。

試劑（G）:主要由苯胺藍和弱酸組成,。

操作步驟：

固定液應(yīng)選用甲醛鹽溶液,、中性福爾馬林試劑（10%，NBF）進行固定,。

1,、切片脫蠟水。

2,、試劑（A）染色5min-10min,。

3、試劑（B）分化,、水洗,。

4、試劑（C）返藍,、水洗,。

5、蒸餾水或者去離子水洗1min,。

6,、試劑（D）染色5-10min。

7,、試劑（E）洗1min,。

8、試劑（F）洗1-2min

9,、試劑（E）洗1min,。

10,、直接放入試劑（G）中染色1-2min。

11,、試劑（E）洗1min,。

12、95%乙醇快速脫水,。

13,、無水乙醇（1）5-10秒。

14,、無水乙醇（2）5-10秒。

15,、無水乙醇（3）5-10秒,。

16、二jia苯（1）1-2分,。

17,、二jia苯（2）1-2分。

18,、二jia苯（3）1-2分,。

19、中性樹膠封固,。

染色結(jié)果：細胞核呈藍色,、胞漿、肌肉,、紅細胞呈紅色,，膠原纖維/蛋白呈藍色。

注意事項：

1,、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,。

2、組織固定起著非常重要的作用,，使用不同的固定液或縮短染色時間

3,、經(jīng)典masson三色染色中，常要求使用試劑A染核,，也可用Harris 蘇木精染核,，但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因為色目的主要在于區(qū)分膠原纖維和肌纖維,，一般也可以省略該染色步驟,。

4、試劑B的分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄,、組織的類別和新舊而定,。

5,、試劑E為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鮮艷,、如果使用量大可自行配制,。

6、用試劑F分化要在鏡下控制,，分化到膠原纖維呈淡紅色,。纖維呈紅色即可。分化時間根據(jù)染色深淺而定,。一般1-2min,。

7、返藍液常使用氨水水溶液,，亦可自行配制Scoot 促藍液或0.1-1%碳酸鋰水溶液,。

8、戴一次性手套操作,。

9,、使用場所應(yīng)通風(fēng)，并遠離火源,。

儲存條件：

2-25℃ 避光