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半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒

一,、半胱氨酸提取 ： 1、 液體樣品中半胱氨酸提?。喝?0.1mL 液體樣品,，加試劑一 0.9mL，充分混勻,，11000 rpm 4℃離心 10min,，取上清液，待測,。 2,、 組織中半胱氨酸提取：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿,，11000 rpm 4℃離心 10 min，取上清液待測,。 3,、 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清,；按照細菌或細胞數量（10 4個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一）,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W,，超聲 3s,，間隔 10s，重復 30 次）,；11000rpm,，4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。二、測定操作： 1. 分光光度計預熱 30 min 以上,，調節(jié)波長到 600 nm,，蒸餾水調零,。 2. 空白管：取 1mL 玻璃比色皿，加入 100 μL 蒸餾水,，500μL 試劑二,，500μL 試劑三，混勻后室溫靜置 15 min,，于 600nm 處測定吸光值,，記為 A 空白管。 3. 標準管：取 1mL 玻璃比色皿,，加入 100 μL 標準液,，500μL 試劑二，500μL 試劑三,，混勻后室溫靜置 15 min,，于 600nm 處測定吸光值，記為 A 標準管,。 4. 測定管：取 1mL 玻璃比色皿,，加入 100 μL 上清液，500μL 試劑二,，500μL 試劑三,，混勻后室溫靜置 15 min，于 600nm 處測定吸光值,，記為 A 測定管,。

半胱氨酸含量計算： 1. 按液體樣品的體積計算：半胱氨酸含量（μmol/mL）=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×（V 樣總÷V 樣）=1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管) 2. 按樣本質量計算：半胱氨酸含量（μmol/g）=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×（V 樣總÷V 樣）÷W=1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管) ÷W 3. 按照蛋白濃度計算：半胱氨酸含量（μmol /mg prot）= [C 標準品×V 標準品×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]÷（V 樣×Cpr）=1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管) ÷Cpr 4. 按細胞數量計算：氨基酸含量（μmol /10 4 cell）=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)] ×（V 樣總 ÷V 樣×細胞數量）=1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管) ÷細胞數量 C 標準品：標準品濃度，1μmol/mL,；V 標準品：反應體系中加入標準品體積,，0.1 mL；V 樣：反應體系中加入樣品提取液體積,，0.1 mL,；V 樣總：加入提取液體積，1mL,。W：樣品質量,，g；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL,。

半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存,。試劑二：液體×1 瓶,，4℃保存。試劑三：粉劑×1 瓶,，4℃保存,。用前 1 天,，向試劑三中加 5 mL 蒸餾水充分溶解，再加磷酸 1.25mL,，混勻后蓋緊（防止水分散失）沸水浴 2h,；冷卻后加 20 mL 蒸餾水，4℃可保存 2 周,。標準品：液體×1 瓶,，1μmol/mL 標準液，4℃保存,。

相關文獻：
《Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings》 作者:Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,Huilan Yi 期刊:Ecotoxicology and Environmental Safety 影響因子:4.527 PMID:29625394