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本公司生產(chǎn)的Pfu DNA Ploymerase是從克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過(guò)柱純化分離出來(lái)的重組蛋白,，其分子量為90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能糾正DNA擴(kuò)增過(guò)程中產(chǎn)生的錯(cuò)配,，而傳統(tǒng)的Taq酶卻不能,，其它耐熱DNA Polymerase如Vent、Deep Vent,、Tli,、UITma等雖具有校正功能，但Pfu酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐DNA Polymerase中出錯(cuò)率低的,。Pfu酶無(wú)5’→3’核酸外切酶活性,，PCR反應(yīng)中的延伸速度一般為0.5-1kb/分鐘，比Taq酶要低,。Pfu 酶比Taq酶熱穩(wěn)定性更好,，95℃ 1小時(shí)仍保持90%以上的活性，對(duì)于GC含量很高D的模板,，變性溫度可以提高到98℃而不影響其活性,。Pfu酶的PCR產(chǎn)物為平末端，可加A處理再與T-載體連接或使用平末端克隆載體,。一般用于DNA的高保真擴(kuò)增,，如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變,、細(xì)胞內(nèi)基因點(diǎn)突變分析(SNP)和末端補(bǔ)平等,。活性定義：1單位(U) Pfu DNA Polymerase活力定義為在74℃,，30分鐘內(nèi),，以活性化的大馬哈魚(yú)精子DNA作為模板/引物，將10nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量,。質(zhì)量控制檢測(cè)：SDS-PAGE檢測(cè)Pfu DNA Polymerase純度大于99%,；經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性