目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測(cè)試劑盒>>生化試劑盒>> D7800DNS試劑 生化試劑盒
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更新時(shí)間：2024-08-19 21:25:10瀏覽次數(shù)：4757評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml；500ml |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | D7800 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖曲線,是測(cè)植物總糖和還原糖檢測(cè)（硝基水楊酸法）的成分之一,。 |
DNS試劑說(shuō)明書(shū)
貨號(hào)：D7800
規(guī)格：100mL/500mL
保存：4°C避光保存,，12個(gè)月有效,。
產(chǎn)品說(shuō)明：
植物體內(nèi)的碳素營(yíng)養(yǎng)狀況以及農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)性狀,，長(zhǎng)以糖含量作為重要指標(biāo),。單糖和某些寡糖（如麥芽糖）含有游離的醛基或酮基,，具有還原性,，屬于還原糖,；多糖和蔗糖等屬于非還原糖?？梢岳枚嗵悄鼙凰崴鉃閱翁堑奶匦酝ㄟ^(guò)測(cè)定水解后的單糖含量對(duì)總糖進(jìn)行測(cè)定,。
DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(cè)（硝基水楊酸法）的成分之一,，其檢測(cè)原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,。在一定范圍內(nèi),，還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,。在540nm處測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系,，利用比色法和標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得樣品中的還原糖和總糖的含量,。本試劑僅用于科研領(lǐng)域,，不宜用于臨床診斷或其他用途,。
自備材料：
1、蒸餾水
2,、50mL離心管
3,、離心機(jī)
4,、水浴鍋或恒溫箱
5,、分光光度計(jì)
6,、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液
操作步驟：（僅供參考）
1,、還原糖的提?。?/span>
（1）稱取植物樣品0.5-3g,，剪碎，加入蒸餾水約3mL勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2-3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。
（2）50°C水浴30min,，并不時(shí)攪拌，以便還原糖*浸出,。
（3）將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50mL離心管,，4000g離心5min,。
（4）留取上清液，向沉淀中加入20mL蒸餾水,，混勻,，再次4000g離心5min,。
（5）留取上清液，將二次獲得的上清液合并,，用蒸餾水定容至100mL（提取液）,，混勻，作為還原糖待測(cè)液,。
2,、總糖的水解和提?。?/span>
（1）稱取植物樣品0.5-3g,，剪碎,，加入蒸餾水約3mL勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12mL蒸餾水沖洗研磨器2-3次,，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。
（2）向容器中加入10mL 6M 鹽酸溶液,，攪拌均勻,，煮沸30min，并不時(shí)攪拌,。
（3）取兩滴滴加于載玻片上,，滴加一滴顯色液，檢查水解是否*,，如已經(jīng)水解*,，則不顯示藍(lán)色。
（4）水解完畢后,，冷卻至室溫,，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4,，用蒸餾水定容至100mL,，混勻，4000g離心5min或過(guò)濾,。
（5）取上清或?yàn)V液10mL,，用蒸餾水定容至100mL，成稀釋1000倍的總糖水解液（提取液）,，取1mL總糖水解液,，測(cè)定其還原糖的含量。
3、制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：取干凈離心管或試管,，按下表進(jìn)行操作,，以0號(hào)調(diào)零，檢測(cè)540nm處吸光度,，以吸光度值為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
加入物質(zhì)（mL） | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Glu標(biāo)準(zhǔn)（1mg/mL） | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
蒸餾水 | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
DNS試劑 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
沸水浴中準(zhǔn)確煮沸5min,，取出，自來(lái)水冷卻至室溫,。 | ||||||
蒸餾水 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 | 9.0 |
相當(dāng)于葡萄糖量 | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
4,、還原糖測(cè)定：取制備好的還原糖提取液或者總糖水解液1mL，分別加入DNS試劑2mL,，其余操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作,，540nm處測(cè)定各管的吸光度。
計(jì)算：
還原糖的百分含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100
總糖的百分含量：
總糖含量（%）=（C×VT）/（m×VS）×100×10×0.9
式中：C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖量（mg）
VT=提取液的體積（mL）
m=植物樣品的質(zhì)量（mg）
VS=測(cè)定時(shí)用的樣品體積（mL）
注意事項(xiàng)：
1,、上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,，以免失效或效率下降。
2,、待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,，應(yīng)置于2-8°C保存，3天內(nèi)穩(wěn)定,。
3,、如果樣品還原糖濃度過(guò)高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。
4、總糖 計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少,、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用,，×0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時(shí)所消耗的水量,。
相關(guān)文獻(xiàn):
[1] Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali. Microbial Pathogenesis. October 2018;132-138. (IF 2.332)
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