產(chǎn)品名稱(chēng): 谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Glutamic Acid(Glu) Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC1580           產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存,；            參考價(jià)格：360
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡(jiǎn)要介紹：
Glu廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過(guò)轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,，是生物體內(nèi)主要氨基來(lái)源之一,。此外，Glu還是味精的主要有效成分,，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn),。
谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH₄⁺,，引起340nm處吸光度的上升,，通過(guò)測(cè)定340nm吸光度的變化，計(jì)算谷氨酸含量。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體100mL×1瓶,，4℃保存,；
試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存，臨用前加入40mL試劑一,；
試劑四：粉劑×1瓶,，-20℃保存，臨用前加入2.5mL 試劑二,；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體0.5mL×1支,，4℃保存。10μmol/mL 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品,。
產(chǎn)品說(shuō)明：
Glu廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,，而且通過(guò)轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來(lái)源之一,。此外,，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn),。
谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸,、NADH和NH₄⁺，引起340nm處吸光度的上升,，通過(guò)測(cè)定340nm吸光度的變化,，計(jì)算谷氨酸含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿,、研缽,、冰、蒸餾水,。
操作步驟：
一,、谷氨酸提取
細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品：收集細(xì)胞或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；按照每1000萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s,，間隔10s,，重復(fù)30次），10000rpm,，常溫離心10min,，取上清待測(cè)。
稱(chēng)取約0.1g組織,，加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿,，10000 rpm，常溫離心10min,，取上清待測(cè),。
二、測(cè)定步驟

1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)340nm,，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

將標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋為2.5,、1.25,、0.625、0.313,、0.156,、0.078、0.039μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,。

3. 在1 mL石英比色皿中加入下列試劑：

（1）標(biāo)準(zhǔn)管：在1 mL石英比色皿中加入200μL標(biāo)準(zhǔn)溶液,、800μL試劑三和50μL試劑四混勻，立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值為A1和5min20s時(shí)的吸光值A(chǔ)2,，計(jì)算?A=A2-A1,。
（2）測(cè)定管：在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本、800μL試劑三和50μL試劑四混勻,，立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值為A1和5min20s時(shí)的吸光值A(chǔ)2,，計(jì)算?A=A2-A1。
三,、谷氨酸含量計(jì)算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以谷氨酸含量（µmol/mL）為x軸,，標(biāo)準(zhǔn)管?A為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b,。將測(cè)定管?A帶入方程得到x值。
2、氨基酸含量計(jì)算：
（1）按照蛋白濃度計(jì)算
谷氨酸含量（µmol/mg prot）=x×V樣本÷（Cpr×V樣本）=x÷Cpr,。
（2）按照樣品質(zhì)量計(jì)算
谷氨酸含量（µmol/g鮮重）=x×V樣本÷（W÷V樣總×V樣本）=x÷W,。
（3）按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
谷氨酸含量（μmol/10⁴ cell）＝x×V樣本÷（1000÷V樣總×V樣本）=0.001x,。
V樣總：加入提取液體積,，1mL,；V樣本：加入的樣本體積,，0.2mL,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣品質(zhì)量,，g,；1000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),，1000萬(wàn)。
注意事項(xiàng)：
為提高檢測(cè)靈敏度,，測(cè)定管的吸光值應(yīng)小于1且?A小于0.4,，若大于此值則需要將上清液用試劑一稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測(cè)定,。

谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang，Chengzhen Liang,，Zhigang Meng,，Yanyan Li，Muhammad Ali Abid，Muhammad Askari,，Peilin Wang,，Yuan Wang,，Guoqing Sun，Yongping Cai,，Shou-Yi Chen,，Yi Lin，Rui Zhang,，Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: