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線粒體分離和酶提取檢測(cè)試劑盒

1,、準(zhǔn)確稱(chēng)取約0.1g 組織或收集約500萬(wàn)細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL試劑四,，用冰浴勻漿器或研缽研磨,。 2、4 ℃ 600 g 離心 5min,。 3,、棄沉淀，將上清液移另一離心管中,，4 ℃ 11000 g 離心 10min,。 4、上清液即胞漿提取物,，可用于研究線粒體蛋白向胞漿的釋放,。 5、沉淀為完整線粒體,。含有完整的內(nèi)膜和外膜,，并具有線粒體的生理功能?？捎糜诰€粒體的生理功能等方面的研究,。 6、在沉淀中加入200uL試劑二和2uL試劑四，超聲波破碎（冰浴,，功率20％或200W,，超聲3秒，間隔10秒,，重復(fù)30次）,，可用于線粒體酶活性測(cè)定。 7,、在沉淀中加入200uL試劑三和2uL試劑四,，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W,，超聲3秒,，間隔10秒，重復(fù)30次）,，可用于線粒體蛋白濃度測(cè)定,。

線粒體分離和酶提取檢測(cè)試劑盒

試劑一：50mL×1 瓶，-20℃保存,；試劑二：10mL×1 瓶,，-20℃保存；試劑三：10mL×1 瓶,，-20℃保存,；試劑四：1mL×1 支，-20℃保存,；

1,、分離線粒體和提取線粒體蛋白質(zhì)的所有步驟均需在冰上或 4℃進(jìn)行，所用溶液需冰浴或 4℃預(yù)冷,。 2,、通常在分離線粒體時(shí)前后兩次離心速度選取 600g 和 11,000g，如果希望純度更高,，但對(duì)線粒體的得率要求不高,，前后兩次離心速度可以采用 1000g 和 3500g。

3,、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作