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丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測試劑盒

注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定,。
貨號: BC1070
規(guī)格: 50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存,。
試劑一：液體 36mL×1 瓶,，4℃保存。
試劑二：液體 20mL×1 瓶,，4℃保存,。
試劑三：粉劑×1 瓶，﹣20℃保存,。
試劑四：粉劑×1 瓶,，﹣20℃保存。
混合試劑：臨用前配制,，將試劑三和試劑四用適量試劑二溶解后再全部轉(zhuǎn)移到試劑二中備用,。
試劑五：液體 5mL×1 瓶,，4℃保存。

產(chǎn)品說明：
PDC 主要存在于酵母中,，是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,，催化丙酮酸脫羧生成乙醛。
PDC 催化丙酮酸脫羧生成乙醛,，添加乙醇脫氫酶（ADH）來進一步催化 NADH 還原乙醛生成乙醇和 NAD+,；NADH 在 340 nm 有吸收峰，而 NAD+沒有,；通過測定 340 nm 光吸收下降速率,，來計算PDC 活性。

試驗中所需的儀器和試劑：
臺式離心機,、紫外分光光度計,、水浴鍋、1mL 石英比色皿,、可調(diào)式移液槍,、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水,。

操作步驟：
一,、粗酶液提取：
1,、細胞或微生物樣品的制備：
先收集細胞或微生物樣品到離心管內(nèi),，棄上清，按照每 500 萬細胞或微生物加入 1mL 提取液,，超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％,，超聲 3s，間隔 10s,，重復(fù) 30 次）,。10000rpm，4℃離心 20min,，取上清,，置冰上待測。
2,、組織樣品：
稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 提取液，冰上充分研磨,。16000g 4℃離心 20min,，取上清，置冰上待測。
3,、血清（漿）樣品：直接檢測,。
二、測定步驟：
1,、 紫外分光光度計預(yù)熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長 340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 試劑一 37℃（哺乳動物）或 25℃（其他物種）水浴提前預(yù)熱 30min。

相關(guān)文獻：

《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin  期刊:Biotechnology for Biofuels 影響因子:5.452 PMID:

丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測試劑盒