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【實驗天地】DNA提取實驗流程

2015-08-18 索萊寶生物

1實驗原理

細(xì)胞在變性劑的作用下被裂解,，同時核蛋白體上的蛋白變性，核酸釋放,；釋放出來的DNA和RNA由于在特定PH下溶解度的不同而分別位于整個體系中的水相和中間相,，從而得以分離；有機溶劑抽提,，沉淀,，得到純凈DNA,。

2試驗方法

材料準(zhǔn)備→破碎細(xì)胞，釋放內(nèi)容物→核酸分離,、純化→核酸的沉淀或吸附及雜質(zhì)的去除→核酸溶解保存

1.試劑盒提取法

公司產(chǎn)品

D1500 植物基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D1600 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D1700 動物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒400.00/700.00

D1800 全血基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D1850 全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng) solarbio 50T/200T 盒 360.00/960.00

D1900 酵母基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D2100 通用基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D2300 真菌基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 500.00/850.00

D2400 DNA病毒基因組提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

D2600 土壤基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 680.00/1200.00

D2700 糞便基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00

2.苯酚氯仿提取法

實驗步驟

① 裂解液（SDS/異硫氰酸胍）,、RNAse、蛋白酶K等55～65℃裂解細(xì)胞,，使蛋白變性,，釋放核酸，加入KAc以提高鹽濃度,，使蛋白質(zhì),、多糖等沉淀。

② 裂解*后加入一定體積的苯酚-氯仿,，混勻后離心取上清,；

③ 加入等體積氯仿-異戊醇，混勻后離心取上清水相,；

④ 加入定量的異丙醇,，使DNA沉淀，加入適量的核酸助沉劑或乙酸鈉以增加核酸的獲得率,，離心除去上清,；

⑤ 用70%的乙醇洗滌1～2次，加入適量氯化鈉或氯化鋰等去除多糖,；(可用PEG代替乙醇,，具有去多糖作用)

⑥ 待酒精揮發(fā)*后，用TE緩沖液溶解DNA,，保存?zhèn)溆谩?/SPAN>

溫馨提示：本公司出售以上實驗中所用到的各種產(chǎn)品,，有意者請！

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3常見問題

4注意事項

① 酚一定要堿平衡,。苯酚具有高度腐蝕性,，氯仿易燃、易爆,、易揮發(fā),，具有神經(jīng)毒作用，操作時應(yīng)注意防護(hù),。

② 取各上清時,不應(yīng)貪多,以防非核酸類成分干擾,；

③ 乙醇洗滌后要充分晾干，以免影響后續(xù)反應(yīng),；

④ 各操作步驟要輕柔,避免因機械損傷,，造成DNA斷裂；

⑤ 為了您的安全，實驗室請帶防護(hù)口罩和手套,。

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