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1,、Q:  支原體污染對細胞有什么危害？
A:  支原體污染后,，不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細 胞無明顯變化,，外觀上給人以正常感覺,，實則細胞收到多方面潛在影響,，如引起細胞變形,， 影響 DNA 合成，抑制細胞生長等,，以致影響實驗數(shù)據(jù)的可信度,。
2、Q:  支原體污染有什么特征,？
A: 細胞狀態(tài)變差,生長變慢,，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生 渾濁。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點,，細胞空泡化,，很多類似凋亡、壞死的細胞,，終細胞漂浮,，*死亡。

3,、Q:  細胞培養(yǎng)時,，顯微鏡下的小黑點是什么？
A: 支原體污染后,，細胞凋亡壞死,，釋放出大量碎片，看起來就像小黑蟲子,。
4,、Q:  細胞通過何種途徑感染支原體？
A: 支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染,、操作者本身的污染（某些支原體在人體是正常菌群如口腔中的支原體）,、培養(yǎng)基的污染、被污染細胞造成的交叉污染,、實驗器材的污染,、制備細胞的原始組織或器官的污染等等，由于支原體大小為 0.1~0.8 um,，無細 胞壁,，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um），血清中也可能含有支原體,。
5,、Q:  支原體污染如何檢測？
A:  利用支原體具特殊專一性之 primers,，經(jīng)由 PCR 反應(yīng)來復(fù)制支原體 DNA,。所用 primers 來自支原體的 conserved 16S-23S rRNA 序列，由于此段序列依支原體種類不同而不同,， 因此可依所復(fù)制之 DNA大小及其 restriction fragment 大小差異來作偵測與鑒定支原體,。

6、Q:  如何清除支原體,？
A:  由于市場同類產(chǎn)品都為抗生素類,，對細胞本身也會產(chǎn)生一定影響，而且有反復(fù)發(fā) 作的風(fēng)險,，吉銳生物推出的 MycoplasmaOUT?Treatment,，活性成分為抗菌肽,，經(jīng)多方測試表明對大部分細胞無毒害作用，因其*的作用原理,，支原體不會對其產(chǎn)生耐藥性,，并且其作用時間短，在三天內(nèi)就可殺滅支原體,，并自動降解成氨基酸,，不會對細胞造成二次污染。

7,、Q:  為什么在培養(yǎng)細胞前要加入MycoplasmaOUT? Prevention,？
A：由于支原體污染后能夠進入細胞，而MycoplasmaOUT? Prevention不能夠進入細胞內(nèi)也就不能殺滅已經(jīng)進入細胞的支原體,，而這部分細胞死亡時會釋放其內(nèi)部的支原體,，需要MycoplasmaOUT?Prevention來殺滅新釋放出的支原體，以防止新生細胞受到污染,。
8,、Q:  所謂的黑膠蟲污染？
A:培養(yǎng)細胞發(fā)現(xiàn)小黑點現(xiàn)象很嚴重,，原來對“黑膠蟲"一說嗤之以鼻,，認為那不過是自欺欺人的借口，覺得怎么也不會發(fā)生在自己身上,。但是真的就碰上了：細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點,，細胞空泡化，很多類似凋亡,、壞死的細胞,，終細胞漂浮，*死亡,。
上述現(xiàn)象很像所謂的“黑膠蟲",。我感覺實際是支原體感染以后細胞生長不好造成的碎片和感染原蟲（現(xiàn)在看來是些胞外囊泡）的混合體。這種現(xiàn)象的直接原因是支原體等原蟲感染,，間接表象是小黑點,，被誤傳為“黑膠蟲"。
光鏡下看不到支原體,，但是可以看到支原體感染的終末現(xiàn)象——細胞凋亡壞死,，釋放出大量碎片，看起來就像小黑蟲子,。
查找類似的帖子——很多人是更換血清后出現(xiàn)這種問題,；
說空氣傳播的可能是一個培養(yǎng)箱的人都用了同一種血清，而不是可以通過培養(yǎng)箱空氣傳播,；感染可能是牛源性的支原體,，通過產(chǎn)道或血行感染。
所謂“細胞生長不受影響",，其實是污染的嚴重程度不高而已,；
支原體污染嚴重就出現(xiàn)細胞大量空泡形成，細胞間空曠地帶出現(xiàn)大量黑點,，細胞終凋亡,、壞死，漂起來,。有些國產(chǎn)血清寫著建議滅活,，其實是掛羊頭賣狗肉，那個56度30分鐘更多的是為了殺殺支原體的,。實際上還有很多殺不死的,。但可以降低產(chǎn)品支原體等微生物污染風(fēng)險。用抗生素殺支原體,，小黑點可以得到抑制,，不過我想*就很難了，而且處理時間很長,，少一個星期,。
抗生素可以抑制細菌細胞壁及蛋白合成，支原體沒有細胞壁,，而且對細胞生長有一定影響,，所以不建議用抗生素殺支原體。
抗菌肽產(chǎn)品殺支原體,，是利用物理的方式,，支原體和細菌表面帶有正電荷，我們的抗菌肽表面帶有負電荷,，通過電荷間的引力作用,，抗菌肽和支原體特異性結(jié)合，通過細胞膜的融合作用,，可以在支原體表面類似打孔的方式,，使得支原體裂解死亡。

摘自小木蟲網(wǎng),，作者：小刀188