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EDTA脫鈣液的使用指南

閱讀:2260      發(fā)布時間:2023-12-26
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脫鈣是制作骨組織切片的重要環(huán)節(jié),,尤其是要進行免疫組織化學(xué)染色的骨組織,。為達到骨組織既充分脫鈣,又保護骨組織中的抗原不被破壞,,需要對含鈣的組織固定之后再進行脫鈣,,然后再行常規(guī)制片ChemicalbookDTA脫鈣液與羥基磷灰石結(jié)晶的外層鈣結(jié)合,,形成可溶性的非離子化合物,,同時又促進晶體內(nèi)層的結(jié)合鈣向外轉(zhuǎn)移。借助這種連續(xù)性的作用使羥基磷灰石晶體逐漸融解,,且pH中性時可起螯合作用,。

EDTA脫鈣液的操作步驟:

1、骨組織脫鈣時,,取材不易過厚,,一般大約 5mm,。

2、組織固定后,,用 PBS 清洗 3 次,,每次 20min

3,、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,,每次 20min

4,、組織轉(zhuǎn)移 2030 倍體積的 EDTA脫鈣液中,,脫鈣 1030 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,,可以置于 37℃進行脫鈣,。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,,多數(shù)組織脫鈣 2 周~3 個月即可,,每周更換一次,直終點,。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù) 35min,,中間間隔 35min

5,、用蒸餾水沖洗數(shù)次,。

6、常規(guī)脫水,、包埋,。

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