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鏈霉親和素（Streptavidin，SA）為Streptomyces Avicllrdi菌培養(yǎng)過(guò)程中的分泌產(chǎn)物,。是大小為66KDa的四聚體蛋白,，一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合，鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10^-14 mol/L數(shù)量級(jí),，是已知自然界中的非共價(jià)相互作用之一,。其特別的結(jié)構(gòu)特性使其廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)中ELISA檢測(cè)信號(hào)的放大。SA亦可用于免疫微孔板,、免疫層析硝酸纖維素膜,、基因芯片，快速固定生物素化的抗原,、抗體,、核酸等物質(zhì)，偶聯(lián)NHS磁珠,、樹脂微球,，廣泛應(yīng)用于發(fā)光診斷,、生物素化物質(zhì)分離、磁性試紙條免疫層析等方面,。

01

測(cè)定包被板結(jié)合活性

1. 用200μL洗滌緩沖液沖洗預(yù)包被酶標(biāo)板，每孔三次,；

2. 準(zhǔn)備1mg/mL的Bio-HRP溶液,，用1:2000的稀釋度對(duì)第一孔進(jìn)行1:2連續(xù)倍比稀釋，在室溫下孵育1小時(shí),；

3. 用200μL洗滌緩沖液清洗每孔4次,；

4. 用100μL底物溶液室溫孵育15分鐘；

5. 加50μL終止液,，測(cè)量每個(gè)孔的吸光度,。

結(jié)果顯示：本公司所產(chǎn)SA包被板結(jié)合活性與X品牌及Y品牌平行，甚至更優(yōu),。

02

雙抗夾心法檢測(cè)

1. 用200μL的Wash Buffer洗滌預(yù)包被酶標(biāo)板,，每孔三次。在每孔中加入100μL生物素化捕獲抗體,，在室溫振蕩孵育60分鐘,；

2. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次，連續(xù)稀釋抗原,，64ng/mL作為高點(diǎn),，同時(shí)設(shè)置0孔，每孔加100μL。在室溫振蕩孵育60分鐘,；

3. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次,。在每個(gè)孔中加入100μL一抗，室溫振蕩孵育60分鐘,；

4. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次,。每孔加入100μL酶標(biāo)二抗。在室溫振蕩孵育30分鐘,；

5. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次,。每孔加入100μL底物溶液室溫孵育20分鐘；

6. 加50μL終止液,，測(cè)量每個(gè)孔的吸光度,。

結(jié)果表明：本包被板顯色更高,，擬合曲線優(yōu)于X品牌及Y品牌,。

03

穩(wěn)定性檢測(cè)

將包被好的SA板條放于37℃進(jìn)行加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，放置16天（約4℃放置24個(gè)月）,，隨后取出進(jìn)行結(jié)合活性檢測(cè),。

結(jié)果顯示：考核16天后，結(jié)合活性O(shè)D值變化不大且梯度良好,，表明包被板穩(wěn)定性良好,。