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丙酮酸測定試劑盒是怎么測得丙酮酸的值?

閱讀:2047      發(fā)布時間:2022-8-29
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丙酮酸是生物代謝及物質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要中間體,,可通過乙醛CoA和三羧酸循環(huán)實現(xiàn)體內(nèi)糖,、脂肪和氨基酸間的相互轉(zhuǎn)化,在營養(yǎng)物質(zhì)代謝過程中起著重要的樞紐作用,。丙酮酸鹽檢測試劑盒提供了一種簡單,、直接和可自動化操作的程序來測量不同生物學(xué)標(biāo)本中丙酮酸的含量。

丙酮酸測定試劑盒的測定步驟:

1,、 分光光度計預(yù)熱30min 以上,,調(diào)節(jié)波長至520nm,蒸餾水調(diào)零,。

2,、取300μ樣本+100μ試劑一于1.5mL EP 管中,混勻,,靜置2min,,加入500μ試劑二,混勻,,于520nm波長處測定管吸光值A,。

丙酮酸的計算方法:

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0466x + 0.0675,; x 為丙酮酸含量(µg/mL),,為吸光值。

2,、按照血清(漿)體積計算

丙酮酸含量(μg/mL= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2=214.6×(A-0.0675)

3,、按照蛋白濃度計算

丙酮酸含量(μg/mg prot=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照樣品質(zhì)量計算

丙酮酸含量(µg/g 鮮重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2=21.46×(A-0.0675) ÷W

5,、按照細菌或細胞密度計算

丙酮酸含量(μg/104 cell)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(500×V1÷V2=0.043×(A-0.0675)

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,,0.3mLV2:加入提取液體積,,1 mL,;V3:加入血清(漿)體積,0.1 mL,;

Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g,;500:細菌或細胞總數(shù),,500 萬。

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