elisa試劑盒測定值與文獻中相差太大怎么辦?
(1),、生化測定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標的變化,。同時，要測定絕對值,，往往是很可能甚至不可能的,。因此，追求的不是絕對值而是相對值,。
(2),、用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此,，如果測定方法不同,，同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一,。因為不同作者用同一試劑盒測定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的,。
(3)、同一種材料,，不同處理,、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標可能發(fā)生很大變化。因此,，能夠直接用來比較的文獻資料本來就不多,。
(4)、當然,，話說回來,，測定值如果與文獻報道相差太大，首先應(yīng)該檢查單位是否一致,，包括摩爾還是毫摩爾,，是干重、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度,，是分鐘還是秒,，等等。其次,，檢查計算是否有誤?最后,，如果相差不是數(shù)量級，通常是很正常的,。
elisa試劑盒反應(yīng)五要素有哪些?
(1),、引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
(2),、引物擴增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
(3),、避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，ELISA試劑盒避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
(4)、引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
(5)、引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第er個堿基,，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
(6),、引物中有或能加上合適的酶切位點， ELISA試劑盒被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,， 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
(7)、引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右,。
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