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線粒體提取試劑盒的使用注意事項(xiàng)

閱讀:962      發(fā)布時間:2021-7-13
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  線粒體提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體,。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備,。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡,、信號傳遞,、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。

  線粒體提取試劑盒在使用時應(yīng)注意以下事項(xiàng):

  1.為保證獲得完整的線粒體,,第一是全程低溫操作,。第二是快速。第三,,在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié),。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,,因而要選用小容量玻璃勻漿器,、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
  2.以離心力g計(jì)算正確的離心速度,,不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計(jì)算離心速度,。
  3.進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體,。

  4.盡量使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。

  5.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

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