在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,用直接法測(cè)定抗體,,不能直接用酶符號(hào)測(cè)定抗體,,然后直接加入底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢?
如果將酶符號(hào)應(yīng)用于待測(cè)抗體,直接法比經(jīng)典法更復(fù)雜,,在探索符號(hào)條件時(shí),,不能保證抗體因誤操作而失活;酶標(biāo)二抗目前已較為常見(jiàn),被規(guī)?;a(chǎn),購(gòu)買后使用方便,。如果你直接做好了,,方法已經(jīng)優(yōu)化了,d一抗二抗顯色,,總時(shí)間加起來(lái),,結(jié)果不會(huì)超過(guò)2到3小時(shí)。
可以使用直接ELISA法,,即抗體包板用來(lái)在抗原上標(biāo)記酶,,然后顯色,這與直接方法相比,,減少了一步的時(shí)間,,縮短了時(shí)間。然而,,直接法和直接法各有優(yōu)缺點(diǎn),,其要求取決于實(shí)驗(yàn)的具體要求。
1,、要檢測(cè)的抗體通常是免疫后產(chǎn)生的抗體,。其中有免疫功能衰竭、抗體過(guò)少等因素存在,。酶符號(hào)的使用存在許多不確定因素,,如在使用酶符號(hào)之前無(wú)法測(cè)量效價(jià)的可能性,這會(huì)導(dǎo)致不必要的混淆,。
2,、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中酶聯(lián)抗體與抗體結(jié)合后,ELISA試劑盒具有很強(qiáng)的信號(hào)放大作用,,可使信號(hào)擴(kuò)增一千倍以上,,適用于低抗體含量的測(cè)定。
3,、直接酶標(biāo)記抗體在篩選出單克隆抗體后可以考慮,,但測(cè)定系統(tǒng)的建立需要大量的工作。
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