今天我給大家講講微生物檢查LB培養(yǎng)基常用的滅菌方法:
1,、濕熱滅菌:蒸汽在冷凝時釋放出大量潛能,,并且蒸汽具有強大穿透力,蒸汽的濕熱破壞菌體蛋白質(zhì)和核酸的化學鍵,,使酶失活,,微生物因代謝障礙而死亡。濕熱滅菌的效果,,取決于致死溫度和致死時間,。致死溫度是殺滅微生物的極限溫度。致死時間是在致死溫度下殺滅全部微生物所需時間,。
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫LB培養(yǎng)基,、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基分裝后應立即滅菌,,應在當天內(nèi)完成滅菌工作,,不可過夜。消毒時間不宜過長,,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,,否則有機物質(zhì)就會在高溫下分解,失去營養(yǎng)作用,,也會使培養(yǎng)基變質(zhì),、變色,甚至難以凝固,。
2,、過濾除菌:一些抗生素及有機物等,遇熱容易分解,不能與LB培養(yǎng)基一起進行高溫滅菌,,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌,,例如含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,,若為液體培養(yǎng)基,,可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時加入;若為固體培養(yǎng)基,必須在培養(yǎng)基凝固之前(50-60℃)加入,,振蕩使溶液與其他成分混合均勻,。
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